基于固本清源治则从肿瘤干细胞和AR/AR-V7通路探讨中药控制去势抵抗性前列腺癌

Prostate cancer is one of the Chinese fastest growing cancers for male. Castration-resistant prostate cancer (CRPC) has become the major limitation of the effect of therapy for prostate cancer. The primary cause of development of CRPC is the activation of AR/AR-V7-mediated signaling pathway. Prostate cancer stem cells have stronger drug resistance and tumorigenicity than regular prostate cancer cells, which lead to is the treatment failure in CRPC; hence the key causes of CRPC are prostate cancer stem cells and AR/AR-V7-mediated signaling pathway. According to the theory of traditional Chinese medicine, cancerous toxin is the main cause of the progress of CRPC. The development mechanism of CRPC is marked by conformity to etiology and pathogenesis of cancerous toxin. We need not just remove the existing cancerous toxin, but also support healthy with which eliminate the root of cancerous toxin. Centralizer radical to eliminate pathogenic illegally is the therapeutic principle of controlling CRPC, hence we choose prostate cancer stem cells and CRPC cells as study object by living tumor-bearing mice imaging technology, magnetic sorting technique etc., from activating AR/AR-V7-mediated NKX3.1/PSA signaling pathway, the detection of the mechanism of GBQY herbs treatment of CRPC. The study can provide rationale reference to therapy of prostate cancer in clinically and improve the effect of therapy of prostate cancer.

前列腺癌是我国增长最快男性恶性肿瘤之一，去势抵抗性前列腺癌（CRPC）是治疗难点。AR/AR-V7介导的通路异常活化是驱动CRPC进展的首要因素。前列腺癌干细胞由于比普通肿瘤细胞具有更强的耐药性和致瘤性是造成CRPC治疗失败的根源。前列腺癌干细胞及AR/AR-V7介导的通路共同构成调控CRPC演进关键机制。中医认为“癌毒”是导致CRPC的重要因素，CRPC演进机制与“癌毒”致病理论相符，针对“癌毒”不仅应清除已生之毒，还要扶正固本杜绝癌毒产生的根源，固本清源是克服癌毒重要法则。据此我们以固本清源方药为干预手段，以CRPC细胞及前列腺癌干细胞为主要对象，以AR/AR-V7介导的NKX3.1/PSA通路为切入点，采用小鼠活体成像、免疫磁珠分选干细胞等方法，从抑制肿瘤干细胞与AR/AR-V7介导通路角度探讨固本清源方药控制CRPC作用机制，以期为临床提供新的思路和用药依据，提高前列腺癌疗效。

前列腺癌是常见男性恶性肿瘤。能否有效控制去势抵抗性前列腺癌决定治疗成败，本项目聚焦这一临床上的重点，通过转化研究探索去势抵抗性前列腺癌演进机制以及中医药作用机制：1）通过去势抵抗性前列腺癌荷瘤小鼠实验显示：低、中、高剂量固本清源方联合雄激素剥夺治疗组抑瘤率分别为27.95%，46.71%，44.46%，其中，中、高剂量固本清源方联合雄激素剥夺治疗组，与单纯雄激素剥夺治疗组比较有统计学差异（P<0.05），研究进一步显示，中、高剂量固本清源方联合雄激素剥夺治疗能下调AR，AR-V7，PSA的mRNA及蛋白表达水平，上调NKX3.1 mRNA及蛋白表达水平，与单纯雄激素剥夺治疗组比较有统计学差异（P<0.05），说明固本清源方联合雄激素剥夺治疗能够一定程度控制去势抵抗性前列腺癌，其作用机制与调控前列腺癌AR/AR-V7信号通路有关；（2）从前列腺癌细胞中分选CD44+CD133+ 亚群并验证其肿瘤干细胞特性；通过接种前列腺癌干细胞荷瘤小鼠实验显示：低、中、高剂量固本清源方联合雄激素剥夺治疗对前列腺癌干细胞荷瘤小鼠的抑瘤率分别为 24.58%，36.67%，40.24%，与单纯雄激素剥夺治疗组比较具有统计学差异（P＜0.05），研究进一步显示接种前列腺癌干细胞荷瘤小鼠肿瘤组织Wnt、β-catenin 蛋白表达水平，与接种普通前列腺癌荷瘤小鼠比较显著升高，两组有统计学差异（P＜0.05）；固本清源方联合雄激素剥夺治疗能下调接种前列腺癌干细胞荷瘤小鼠肿瘤组织Wnt、β-catenin 蛋白表达水平，与单纯雄激素剥夺治疗组比较有统计学差异（P＜0.05），说明固本清源方联合雄激素剥夺治疗能够抑制前列腺癌干细胞，其作用机制与调控其Wnt/β-catenin 通路有关。通过以上研究揭示AR/AR-V7介导的NKX3.1/PSA通路是驱动前列腺癌演进的首要因素，前列腺癌干细胞是导致治疗失败的根源，AR/AR-V7介导通路和肿瘤干细胞共同构成调控去势抵抗性前列腺癌的关键机制，并从中医角度证明固本清源是防治去势抵抗性性前列腺癌的重要法则，中医药与雄激素剥夺治疗结合可以发挥协同效应，为临床提供新思路，提高前列腺癌治疗效果。在国家核心期刊发表相关论文2篇，已录用相关论文2篇。