离体不同力学作用和在体毫针基本刺激对腧穴筋膜成纤维细胞信号传导与蛋白表达差异的研究

毫针针刺对机体的有效刺激在本质上是直接和（或）间接作用于周围组织的不同形式的机械力，其作用存在非神经生物学机制途径，而筋膜结缔组织在介导针刺效应发挥中具有重要意义。有鉴于此，经过前期研究课题组从细胞生物力学角度建立起针刺效应的非神经组织细胞生物学启动机制理论框架，但不同力学作用如何在筋膜组织成纤维细胞内传导，不同力学刺激如何调节细胞蛋白活性物质合成表达，在体情况下哪种（或哪些）力学因素的生物物理学效应是主要效应，目前都不清楚。.本项目离体研究通过对体外培养的腧穴筋膜成纤维细胞施加不同强度的压力、摩擦力和牵张力刺激，用激光共聚焦显微扫描分析技术和蛋白芯片技术，观察不同应力刺激后细胞骨架机械信号传导与蛋白表达规律的差异，并采取在体综合研究对比及验证，探索针刺疗法"通经脉，运气血，扶助正气"的可能物质基础，为全面认识毫针针刺治疗作用的生物力学激发机制提供新的实验依据，继续丰富和发展刺灸基础理论。

毫针针刺对机体的有效刺激在本质上是不同形式的机械力学刺激作用，存在神经和非神经生物学机制两种作用途径，而在非神经生物学机制途径中筋膜组织在介导针刺效应发挥中具有重要意义，所以研究不同力学作用如何被筋膜组织细胞感受和传递、如何调节细胞蛋白活性物质合成表达以及哪些体外力学效应是在体情况下的主要效应将有助于更全面地认识毫针针刺治疗作用的现代医学原理。. 本项目通过对腧穴筋膜成纤维细胞体外实施不同强度的压力、摩擦力和牵张力刺激，观察各种力学刺激后细胞机械信号感传与蛋白表达规律的差异，并回归在体研究予以验证及对比，结果证实：腧穴筋膜成纤维细胞能够感传不同的力学刺激信号、并调节多种蛋白的合成，其中细胞均对中等强度适宜刺激感传效率最佳、蛋白表达调节幅度最大，但力学形式不同，在体与离体情况不同，力学信号感传方式与蛋白表达调节趋势各异——①体外力学刺激，压力和张力能显著提高腧穴筋膜成纤维细胞的细胞活率，摩擦力能明显影响细胞形态、促进细胞的生长。②体外力学刺激，腧穴筋膜成纤维细胞微管和中间丝可能不是力学信号的主要传递途径，β1类整合素-微丝通路是信号的主要感传途径。③体外力学刺激，压力和张力作用总体上调多种蛋白的表达，但中等强度张力在促进蛋白表达的同时，也大量抑制其他蛋白的表达；而摩擦力总体以下调多种蛋白表达为主，其上调蛋白表达的数量较少，尤其以中度摩擦力的这种调节表现最为明显。④在体毫针刺激，针体能带动腧穴筋膜组织和胶原纤维产生位移，成纤维细胞增殖数量增多、活力增大，形态改变；β1类整合素-微丝系统可以明显感受和传递毫针针刺力学信息，微管在细胞感受毫针刺激后，能根据力学环境发生改变，参与力学信息的向内传递，而中间丝不能敏感反应这种变化，可能不是力学信息传递的主要途径；毫针不同强度刺激对腧穴局部筋膜组织蛋白表达都有明显调节作用，其中，细针弱刺激总体调节幅度最小，且以上调为主，中针中等刺激调节幅度最大，上调与下调蛋白数均最多，粗针强刺激调节幅度介乎于细针和中针之间；⑤整体评估与分析提示，毫针针刺激发腧穴局部微观生物力学的效应可能主要是摩擦力和张力两种力学因素的综合表现。. 本研究揭示了腧穴筋膜组织细胞是如何将毫针针刺外界力学信息转换为内生生化信息的现代生物医学过程；研究为全面认识毫针针刺治疗作用的生物力学激发机制提供新的实验依据，进一步丰富和发展了刺法灸法学基础理论。