哈萨克族食管癌中基因甲基化与其表达关系的研究

哈萨克族食管癌是我区特高发疾病之一，严重威胁着哈萨克族人民的生命和健康。目前对食管癌以手术为主的综合治疗效果已处于平台期，其5年总生存率仅为10％。故早期诊断，早期治疗才是提高生存率的首要手段。现代肿瘤理论认为表遗传学机制参与了肿瘤发生的早期过程，因此DNA甲基化的研究对食管癌的早期诊断具有重要意义。目前，还没有对哈萨克族食管癌相关基因甲基化状态的研究，本研究选取了与食管癌相关的十个基因，拟从基因转录水平，甲基化程度水平研究它们在哈萨克族食管癌组织及正常组织中的表达差异，从而探讨它们在哈萨克族食管癌的发生发展中所起的作用，并初步探讨甲基化状态的改变与其基因表达改变的关系，试图寻找哈萨克族食管癌的早期生物学标志和肿瘤基因治疗的靶点，为哈萨克族食管癌分子生物学发病机制的阐明奠定基础。

哈萨克族食管癌是我区特高发疾病之一，目前对食管癌以手术为主的综合治疗效果已处于平台期，其5年总生存率仅为10％。故早期诊断，早期治疗才是提高生存率的首要手段。现代肿瘤理论认为表遗传学机制参与了肿瘤发生的早期过程，因此DNA甲基化的研究对食管癌的早期诊断具有重要意义。基于缺乏对哈萨克族食管癌相关基因甲基化的研究，选取与食管癌相关的10个基因，在哈萨克族食管癌30对组织标本中，研究哈萨克族食管癌组织及癌旁组织中的表达差异与甲基化程度改变的关系，试图寻找早期生物学标志和肿瘤基因治疗的靶点，为阐明哈萨克族食管癌分子发病机制奠定基础。经RT-PCR检测癌与癌旁组织在转录水平的表达，并通过高分辨率熔解曲线及CpG片段测序法，对甲基化程度进行检测。比较其转录水平表达与甲基化程度的关系，发现survivin 癌组织mRNA表达水平明显高于癌旁组织（P＜0.05）。在2个CpG位点中，甲基化程度均较低，其中1个位点癌旁组织甲基化程度明显高于癌组织（P＜0.05），提示其启动子区CpG岛甲基化并没有直接调控基因的表达。MGMT 癌组织mRNA表达与癌旁组织差异有统计学意义(P<0.05)。而MGMT20个CpG位点中，甲基化程度均较高，有1个位点癌与癌旁组织甲基化程度有差异(P<0.05)，说明启动区甲基化程度与表达无直接联系，或者此位点的甲基化程度较大影响了其表达。p16mRNA表达癌组织与癌旁组织无差异。19个CpG位点癌与癌旁组织均无甲基化。FHIT mRNA表达癌组织与癌旁组织相比降低，但无差异，9个CpG位点中甲基化程度均较低，其中有3个位点癌组织甲基化程度大于癌旁组织，提示可能是甲基化程度的升高影响了其表达。hMLH1 癌组织mRNA表达阳性率明显高于癌旁组织（P<0.05)，癌与癌旁组织均无甲基化。Rb基因3个CpG位点中，甲基化程度及甲基化率均较低且癌与癌旁甲基化程度无差异，而其mRNA的表达癌与癌旁组织也无差异。提示hMLH1和Rb启动区甲基化程度与表达无直接联系，或者甲基化与否不是决定该基因表达的主要因素。RUNX3基因2个CpG位点，cdc42基因12个CpG位点，甲基化程度及甲基化率癌与癌旁组织均较高，但二者无差异。wnt-5a 基因2个CpG位点，Rassf1 基因2个CpG位点甲基化程度及甲基化率癌与癌旁组织均较低，但二者无差异。