CD226分子抗小鼠胸腺细胞凋亡的分子机制

胸腺是机体重要的中枢免疫器官，多种分子在其发育中发挥重要的作用。人CD226是主要表达于活化T细胞和NK细胞上的免疫球蛋白超家族分子。2001年我们首次从小鼠胸腺克隆出小鼠CD226基因，并发现CD226转基因小鼠胸腺细胞CD226表达水平升高，同时伴有胸腺细胞数量明显增多；在小鼠胚胎胸腺器官培养（FTOC）模型中，用siRNA下调CD226表达可明显减少胸腺细胞生成的数量，同时伴有survivin分子的表达下降，凋亡的发生增加。基于survivin分子在胸腺细胞中的表达和功能，我们认为CD226有可能通过调节survivin分子的表达，参与胸腺细胞发育，但具体途径仍不清楚。本课题拟以survivin和PI3K/Akt、MAPK/ERK、JAK/STAT三条信号转导通路为主要研究对象，阐明CD226抗胸腺细胞凋亡的信号通路，从而为全面了解胸腺细胞发育的分子机制提供重要的理论依据。

胸腺是机体重要的中枢免疫器官，许多分子在其发育中发挥重要的作用。人CD226是主要表达于活化T细胞和NK细胞上的免疫球蛋白超家族分子。2001年我们首次从小鼠胸腺中克隆出小鼠CD226（GenBank: AF416980），其表达谱与人CD226相似，并表达于小鼠胸腺细胞各亚群。前期我们发现CD226转基因小鼠胸腺细胞CD226表达水平升高，同时伴有胸腺细胞数量明显增多；在小鼠胚胎胸腺器官培养（FTOC）模型中，用siRNA下调CD226表达可明显减少胸腺细胞生成的数量，同时伴有survivin分子的表达下降，凋亡的发生增加。基于survivin分子在胸腺细胞中的表达和功能，我们认为CD226有可能通过调节survivin分子的表达，从而维持胸腺细胞发育过程中的自稳态扩增，但具体途径仍不清楚。本课题以EL-4细胞和CD226基因敲除小鼠为模型，主要结果包括（1）利用慢病毒成功建立了CD226低表达的EL-4细胞系；（2）CD226低表达的EL-4细胞系凋亡增加，细胞周期发生G2/m期阻滞；（3）CD226低表达的EL-4细胞系survivin表达降低，Akt和ERK1/2的磷酸化水平降低；（4）引进的CD226基因敲除小鼠胸腺细胞不表达CD226分子，凋亡的发生无明显变化；（5）在CD226基因敲除小鼠中，胸腺细胞发生G2/m期阻滞；（6）CD226基因敲除小鼠的胸腺细胞survivin表达减少，ERK1/2的磷酸化水平降低，p21的表达水平升高；（7）与CD226拥有相同配体的抑制性受体分子TIGIT在胸腺细胞上表达水平很低；（8）CD226基因敲除小鼠脾脏T细胞的增殖能力明显降低。这些结果阐明CD226通过Akt和MAKP通路引起抗胸腺细胞凋亡和促进增殖的作用，使我们更全面了解了CD226分子的功能，为明确胸腺细胞发育的分子机制提供了重要的理论依据。