肺炎链球菌SPD1672蛋白经MAPK-STAT3串话影响小鼠天然免疫反应的研究

肺炎链球菌spd1672是前期课题筛选出的体内诱导基因。已证实SPD1672蛋白存在于菌体表面，调控磷壁酸的合成，是一个新的重要毒力因子。它能影响宿主的天然免疫，但其免疫应答机制并不清楚。.本课题拟用表达纯化的SPD-1672蛋白、spd-1672缺陷菌株和野生菌，分别与小鼠巨噬细胞RAW264.7、肺泡上皮细胞MLE-12共同孵育，通过体外实验研究SPD-1672在激活宿主细胞天然免疫反应中的作用，寻找其识别受体，探讨MAPK和STAT3通路的激活和串话；然后通过小鼠S.pn肺炎模型，从体内实验进一步研究SPD-1672引起宿主的天然免疫应答和信号通路激活。.本研究不仅有利于阐明细菌的毒力相关蛋白及功能，而且可揭示宿主的抵抗策略及其应答调节机制，为肺炎链球菌感染的治疗防疫等临床实践提供新的理论基础。

肺炎链球菌毒力因子和宿主免疫受体间的相互作用经激活特异的信号通路诱发机体免疫反应。GHIP是本课题组前期发现的一种新的肺炎链球菌毒力因子，本课题拟探究在细菌感染早期GHIP激活小鼠天然免疫反应的作用以及所涉及的信号传导机制。我们成功了构建D39△ghip缺陷菌和△ghip回复突变菌株，与野生菌对比充分地证明GHIP的表达增强了肺炎链球菌对中性粒细胞杀菌作用的抵抗力，促进了肺炎链球菌在感染小鼠体内的入血播散。体内和体外实验均证实了GHIP能刺激宿主促炎细胞因子TNF-α、IL-6的分泌 。体内肺炎模型研究显示LLP促进在感染肺组织局部炎症细胞的募集，增强了中性粒细胞功能的激活。进一步的机制研究发现GHIP作用于巨噬细胞后由TLR2识别，激活p38MAPK和JNK信号分子磷酸化，从而启动了细胞因子的表达分泌。 可见，GHIP是一个新的肺炎链球菌重要毒力因子，在肺炎链球菌感染中影响细菌体内存活，诱导机体天然免疫应答起着重要作用。