Pyk2促进肝癌细胞迁移的一个新发现的分子机制研究：结合并磷酸化E-cadherin?

E-cadherin的丧失与肝癌转移密切相关。其丧失的主要原因是由于酪氨酸残基被磷酸化后蛋白被降解。我们通过酵母双杂交发现一个新的能与E-cadherin相互作用的非受体型酪氨酸激酶Pyk2。Pyk2活性增强可促进肝癌细胞迁移。本课题证明Pyk2结合并磷酸化E-cadherin，导致E-cadherin蛋白降解，细胞迁移性增加。本课题首先通过GST pulldown、免疫共沉淀证明二者相互作用可靠；其次通过磷酸化实验确证Pyk2可以磷酸化E-cadherin；然后应用细胞迁移实验和裸鼠成瘤实验确定：Pyk2通过磷酸化E-cadherin而影响肝癌细胞迁移和肿瘤转移；最后分析在人肝癌标本中二者表达的相关性以及与转移的关系。本课题新发现Pyk2可以直接磷酸化E-cadherin，促进肝癌细胞迁移和肿瘤转移，具有国际先进性。这对于肝癌侵袭转移的复杂机制有新的理解，为药物研发提供新的思路。

本课题通过酵母双杂交发现一个新的能与E-cadherin相互作用的非受体型酪氨酸激酶Pyk2。通过GST pulldown、免疫共沉淀证明二者相互作用可靠；其次通过磷酸化实验确证Pyk2可以磷酸化E-cadherin；然后应用细胞迁移实验和裸鼠成瘤实验确定：Pyk2能够影响肝癌细胞迁移和肿瘤转移；最后分析Pyk2在人肝癌标本与肝癌恶性程度有相关性。