炎症通路及环境暴露与缺血性脑卒中关系的分子流行病学研究

采用病例对照、病例-同胞研究等设计方法，调查选定人群的环境暴露情况；用ELISA测定血浆中hsCRP、NF-κB、TNF-α、IL-1β等炎症因子水平；运用BeckMan Genetic Analysis System、Taqman探针荧光定量PCR等技术检测炎症反应通路上多个基因多态性及基因表达水平；并采用荧光素酶报告基因检测系统研究多态性对基因表达的影响。从环境、基因、表型和基因表达多维度揭示NF-κB激活的炎症信号转导通路与脑卒中的关系；同时采用TASSEL软件构建单倍型块并筛选出其中的htSNP；最后采用分类回归树方法构建缺血性脑卒中发病风险预测模型。本研究有望为脑卒中发病机制的阐明、个体化危险性评估及预警模型的建立提供科学的依据。

本项目为探讨炎症通路相关基因SNPs在缺血性脑卒中发生中的作用，从分子水平揭示脑卒中的发病机制，开展了病例-对照研究，并采用高通量基因分析技术、单碱基延伸后测序法等技术扫描炎症通路相关基因多态性位点及相关基因表达情况，从环境因素、基因型、基因表达等角度揭示炎症通路相关基因在缺血性脑卒中发生中的主效应、与环境因素的交互效应、基因之间的交互效应，找出影响缺血性脑卒中发生的多态性位点，采用分类回归树方法构建缺血性脑卒中发病风险预测模型。.主要结果：①发现SPES1基因rs4965814位点TC基因型是中国北方汉族男性缺血性脑卒中发生的危险因素，CC基因型是女性缺血性脑卒中发生的危险因素；未见rs34713741C/T多态性与北方汉族人群缺血性脑卒中发生有关。②发现TNF-a基因-308GA多态性是中国北方汉族人群缺血性脑卒中发生的危险因素。未见+488G/A多态性与中国北方汉族人群缺血性脑卒中发生有关联；携带MMP-3基因rs3025058 6A/6A基因型和6A等位基因可降低缺血性脑卒中的发生风险。③未见LRRFIP1基因（rs3769053）、MIF基因（rs755622）、FasL基因（rs5030772）和CRP基因（rsl130864）与缺血性脑卒中的发生有关。④应用MDR 模型筛选出SEPS1 rs4965814-饮茶、rs4965814-rs34713741存在交互作用，SEPS1 rs4965814-饮茶可降低rs4965814单独作用的风险，rs4965814-rs34713741交互作用可增加单独 rs4965814引起的缺血性脑卒中发生的风险。⑤建立缺血性脑卒中发生风险的预测模型，灵敏度和特异度分别为80.4%和50.2%，ROC曲线下的面积为0.719。该模型可以较好的预测缺血性脑卒中的发生风险。.本研究阐述了炎症通路相关基因SNPs在缺血性脑卒中发生中的作用，预测缺血性脑卒中的发生风险，为脑卒中发病机制的阐明、个体化危险性评估及预警模型的建立提供科学的依据。