维生素 D缺乏通过核因子κB/COX2代谢通路促进尿毒症甲状旁腺增生的机制研究

甲状旁腺过度增生是尿毒症继发甲状旁腺功能亢进的主要病理形态学改变，也是影响药物治疗的关键，但发病机制未明。尿毒症时维生素D缺乏是最常见的诱因之一，最近在肿瘤研究中发现维生素D可显著抑制核因子κB（NFκB）高表达以及前列腺素作用，进而抑制肿瘤增生。本课题组新近证实前列腺素合成酶环氧化酶2（COX2）代谢活化是导致尿毒症甲状旁腺增生的重要环节，而COX2基因转录受NFκB的调控，其启动子中有NFκB结合位点，故我们推测：尿毒症时因维生素D作用减弱，诱发甲状旁腺细胞内NFκB过度活化，促使COX2基因高表达及前列腺素代谢异常，导致细胞增生。本研究拟通过尿毒症患者甲状旁腺标本、甲状旁腺细胞培养、尿毒症甲旁亢动物模型及维生素D受体基因缺陷小鼠，系统观察维生素 D /NFκB/COX2调节通路在甲状旁腺增生中的确切作用，了解多靶点阻断对尿毒症甲状旁腺增生的治疗作用，为临床防治提供新方向。

为了阐明维生素D/NFκB/COX2 调节通路在慢性肾衰竭甲状旁腺异常增生中的作用，本课题组开展了如下工作：（1）通过甲状旁腺切除术获得尿毒症患者甲状旁腺标本，以及尿毒症甲旁亢动物模型，明确甲状旁腺组织中VDR、NFκB、COX2 的表达差异；（2）通过给予尿毒症甲旁亢大鼠NFκB抑制剂或VDR激动剂干预，明确甲状旁腺局部NFκB活化参与尿毒症甲旁亢大鼠甲状旁腺的增生，VDR激活可通过抑制NFκB活化纠正尿毒症甲大鼠甲状旁腺的增生；（3）完成VDR-flox转基因小鼠的构建与鉴定，将按照计划构建甲状旁腺特异性VDR基因缺陷小鼠，了解甲状旁腺组织中NFκB的相关作用；（4）成功建立尿毒症患者甲状旁腺组织块体外培养体系，获得稳定的pLv-IKKβ病毒（激活NFκB活性）及pLv-IκBα病毒（抑制NFκB活性），计划一年内完成干预性研究。上述研究揭示了维生素 D /NFκB/COX2 调节通路的异常直接参与了慢性肾衰竭甲状旁腺异常增生，纠正维生素D的作用下降或阻断NFκB的激活能显著纠正尿毒症甲状旁腺病变。本研究属于原创性临床基础科研，对尿毒症甲旁亢发病机制的进行了深入探讨。研究涉及尿毒症甲旁亢动物模型的建立、大鼠甲状旁腺组织的显微分离、人甲状旁腺组织体外培养以及条件性基因缺陷小鼠构建等实验技术，为相关领域的研究提供了参考经验和技术平台。研究成果已在国内核心期刊发表论文2篇，国际杂志3篇（SCI收录），包括本领域权威杂志Clin Am J Soc Nephrol 1篇（影响因子5.25）。在项目实施过程中主要培养1 名科研型博士生，另有1名博士及2名硕士在读。该项目基本完成计划书中的考核目标。