环氧化酶2及其下游通路在尿毒症甲状旁腺增生中的作用研究

继发性甲状旁腺功能亢进是尿毒症患者最常见的并发症，甲状旁腺腺体增生是主要的形态学改变，也是导致药物治疗失败的关键，但其发生机制目前并不清楚，也没有很好的干预手段。新近研究证实花生四烯酸经环氧化酶-2（COX2）代谢产生的一系列前列腺素直接参与了肿瘤细胞的异常增生。本课题组也曾于国内外率先报道在尿毒症患者甲状旁腺组织中同样存在COX2的高表达，推测COX2代谢通路的激活可能参与了尿毒症甲状旁腺的异常增生。故本研究将通过尿毒症患者甲状旁腺标本、构建EP2基因缺陷尿毒症甲旁亢动物模型以及体外培养人甲状旁腺细胞和组织块的方法，系统观察COX2及其下游通路（mPGES1-PGE2-EP2）在甲状旁腺增生发生和发展过程中的作用；明确该通路是否也是钙磷紊乱导致甲状旁腺增生的共同细胞内信号通路；了解EP2阻断对甲状旁腺增生的治疗作用。旨在提出尿毒症甲状旁腺增生的新学说，为临床早期预防和治疗提供新方向。

为了阐明环氧化酶2（COX2）及其下游通路在慢性肾衰竭甲状旁腺异常增生中的作用，本课题组开展了如下工作：（1）在尿毒症继发性甲状旁腺功能亢进患者中证实其增生的甲状旁腺组织中存在COX2及其下游代谢通路mPGES1-PGE2-EP2的异常高表达，在结节性增生的部位更为明显，与甲状旁腺细胞的增生程度密切相关。（2）在SD大鼠中利用5/6肾大部切除+高磷饮食构建尿毒症甲旁亢动物模型，证明在弥漫性增生的甲状旁腺腺体中同样存在COX2及其下游通路mPGES1-PGE2-EP2的高表达，给予COX2抑制剂治疗能显著纠正尿毒症大鼠甲旁亢及甲状旁腺增生。（3）在体外培养的尿毒症患者甲状旁腺组织块中，给予高磷培养液能显著刺激PTH分泌和甲状旁腺细胞增生，同时伴有PGE2的产生增加；应用 COX2 拮抗剂、 mPGES1拮抗剂或EP2受体拮抗剂干预后，高磷的上述作用被明显抑制；给予正常磷培养液+PGE2或EP2激动剂则能同样促进PTH合成分泌和甲状旁腺增生。上述研究均提示局部COX2及下游通路mPGES1-PGE2-EP2的异常活跃直接参与了尿毒症时高磷诱导的甲状旁腺功能亢进和组织增生，阻断该通路能明显纠正尿毒症甲状旁腺病变。.本研究属于原创性临床基础科研，于国内外率先提出尿毒症甲旁亢发病机制的新学说。研究涉及尿毒症甲旁亢动物模型的建立、大鼠甲状旁腺组织的显微分离、人甲状旁腺组织体外培养等实验技术，为相关领域的研究提供了参考经验和技术平台。研究成果已在国内核心期刊发表论文2篇，国际杂志3篇（SCI收录），包括本领域最权威杂志Am J Soc Nephrol 1篇（影响因子9.663）。在项目实施过程中主要培养1 名科研型博士生和2名科研型硕士生，其中一名硕士生毕业论文获得上海市优秀硕士论文（题目：选择性环氧化酶2下游通路mPGES1-PGE2-EP2在慢性肾衰竭甲状旁腺异常增生中的作用研究），另1名硕士转博，1名博士在读。该项目基本完成计划书中的考核目标。