重症胰腺炎胰腺局部ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴改变及其作用机制研究

重症胰腺炎（SAP）与RAS激活密切相关。ACE2是RAS又一新关键酶，通过ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴发挥作用，新近发现小鼠胰腺中存在ACE2、Mas受体表达，我们先期实验表明SAP小鼠胰腺ACE2表达呈动态变化，故本项目探讨SAP时胰腺局部ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的改变及其作用机制：①动态观察C57BL/6SAP小鼠胰腺局部ACE2、Ang(1-7)、Mas受体表达改变，明确SAP胰腺局部ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的变化规律。②分别观察ACE2基因敲除C57BL/6SAP小鼠、给予Mas受体拮抗剂C57BL/6SAP小鼠、给予PI3K拮抗剂C57BL/6SAP小鼠胰腺ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴、PI3K/Akt通路及NO、eNOS的改变。探究SAP胰腺局部ACE2-Ang(1-7)-Mas受体轴的作用机制。

课题完成情况：本课题已顺利完成。.本课题应用C57BL/6小鼠、ACE2基因敲除C57BL/6小鼠，雨蛙素联合脂多糖腹腔注射法制造重症胰腺炎小鼠模型。比较造模后死亡率、血清生化指标，胰腺组织病理情况。实时定量PCR检测胰腺组织RAS成分ACE、AT1、ACE2、Mas mRNA的表达，Western blot方法测定ACE2、Mas受体蛋白在胰腺的表达水平，免疫组化方法测定ACE2、Mas、AT1蛋白在胰腺的定位及表达情况。ELISA方法检测小鼠血清中淀粉酶、TNF-α、IL-1、IL-6、IL-8、IL-10以及胰腺中Ang（1-7）的含量。.结果：（1）在小鼠胰腺组织中，确实存在ACE2－Ang(1-7)－Mas受体轴；SAP造模成功后12-24小时ACE2、Ang（1-7）、Mas受体基因及蛋白表达开始明显上调，显著高于正常对照组。而AngII及AT1在造模成功后2小时即开始明显升高，反应相对较早。.（2）C57BL/6 SAP小鼠与ACE2-KO C57BL/6 SAP小鼠在不同时间点进行比较，证实ACE2－Ang(1-7)－Mas受体轴在SAP时起到保护胰腺组织的作用： .结论：小鼠发生重症胰腺炎时其RAS的新轴成份ACE2、Mas受体mRNA及蛋白表达水平上调，ACE2－Ang(1-7)－Mas轴能够拮抗经典轴ACE-AngII-AT1的作用，主要是通过上调PI3K/AKT信号传导通路、增加NO释放来发挥保护胰腺细胞的作用。.成果：已发表SCI文章1篇（另有2篇已修回），中文论著1篇，中文综述1篇，毕业博士生2名，参加国内学术会议并做学术报告2次。