口服小檗碱体内代谢产物及其衍生物降血脂活性构效关系研究

小檗碱是中药黄连、黄柏的主要化学成分，在其降血脂机制研究过程中发现，体外降脂活性对其要求的浓度较高，而小檗碱口服给药后生物利用度差，血药浓度低，很难达到体外研究所需的药效浓度。我们在前期研究中发现小檗碱在大鼠和人体内发生广泛的代谢，且部分代谢产物降脂活性较强，据此推测：小檗碱的代谢产物可能是其体内发挥药效的主要物质基础。本研究课题拟在体内代谢产物系统研究的基础上，运用分子生物学、生物化学的方法筛选使LDLR（低密度脂蛋白受体）表达上调的代谢物以及抑制胆固醇与甘油三酯合成的代谢物，并在活性代谢产物明确的基础上合成系列衍生物探讨其构效关系，优化先导化合物，为寻找新型的降血脂药物提供线索和科学依据。本项目的实施完成将为口服生物利用度低的中药药效成分研究提供参考，同时为从中草药中发掘活性先导化合物探索一条新路，在中药研究急需现代化的今天具有重大的理论和现实意义。

小檗碱（berberine, BBR）是中药黄连、黄柏的主要化学成分，在其降血脂机制研究过程中发现，体外降脂活性对其要求的浓度较高，而小檗碱口服给药后生物利用度差，血药浓度低，很难达到体外研究所需的药效浓度。我们推测小檗碱的代谢产物可能是其体内发挥药效的主要物质基础。本研究课题从小檗碱体内代谢产物研究出发，设计合成代谢产物衍生物，进而运用分子生物学、生物化学的方法筛选使LDLR（低密度脂蛋白受体）表达上调以及激活AMPK（AMP激活的蛋白激酶）的代谢物及衍生物，并进一步深入研究其发挥抑制胆固醇与甘油三酯合成的作用机理，为寻找新型的降血脂药物提供线索和科学依据。 具体情况及所获成果如下：.1、黄连中富含小檗碱及其类似物，通过对大鼠灌胃黄连提取物的尿液中代谢产物进行分离，得到11种代谢产物，经过酶水解获得一相代谢产物10种。从黄连中制备小檗碱代谢产物及其类似物8种，通过化学合成的手段合成小檗碱代谢产物衍生物共21种。.2、LDLR是位于细胞表面的跨膜受体，对体内富含胆固醇的脂蛋白代谢起着关键性的作用。上调肝脏LDLR的表达是降低血液胆固醇浓度的最主要策略之一。我们运用RT-PCR、Western杂交及油红O染色的方法考察小檗碱体内代谢产物及衍生物对LDLR表达的影响。结果表明BBR四种Ⅰ相代谢产物与BBR同样具有上调LDLR的效果，并初步探讨了构效关系。.3、AMPK作为细胞的“能量调节器”，在糖脂代谢中发挥着极为重要的作用。AMPK 对脂肪的调节主要是通过抑制合成和促进脂肪酸的氧化这两条途径实现的。目前AMPK已经成为治疗高脂血症的一个重要靶点。我们应用甘油三酯试剂盒考察小檗碱体内代谢产物及其衍生物对HepG2细胞内甘油三酯含量影响，并初步探讨了构效关系。进而运用Western杂交及RT-PCR方法深入探讨小檗碱代谢产物及其衍生物降低甘油三酯的作用机制。实验结果表明，16和43与BBR一样发挥降低甘油三脂的作用，其降脂作用的机制可能为通过激活AMPK信号途径上调甘油三脂降解相关酶的mRNA表达，同时下调甘油三脂合成相关酶的mRNA表达来实现的。.相关成果已发表论文3篇，其中SCI收录论文1篇，正在投稿的SCI收录论文2篇。