胃癌MDR相关新型DNA甲基转移酶的研究

多药耐药（multidrug resistance, MDR）是胃癌临床治疗中面临的主要障碍之一，其发生机理远未阐明。我们克隆了一个在具MDR表型的胃癌细胞中表达上调的新基因，初步研究证实该基因与胃癌MDR相关，生物信息学分析提示该基因为DNA甲基转移酶候选分子。本研究拟进行该基因的原核表达并制备单克隆抗体；进行昆虫细胞表达，测定其体外DNA甲基转移酶活性；以EGFP融合表达和免疫组化法确定该基因表达产物的亚细胞定位；通过基因转染及RNAi技术，经MTT试验、药物蓄积和潴留试验、细胞凋亡、细胞周期的观察探讨其在胃癌多药耐药发生中的作用；通过甲基化特异性基因芯片技术检测该基因表达上调及下调后耐药相关基因甲基化变化；以基因芯片技术检测该基因表达上调及下调后细胞内基因表达谱的变化，揭示其在胃癌MDR发生中的作用及其机理，丰富对胃癌MDR发生机理的认识并有望为逆转胃癌MDR提供一个新的靶分子。