丙型肝炎病毒新受体Occludin和Claudin-1的生物学功能研究

丙型肝炎病毒（ HCV）是重要的人类病原体，可导致肝硬化和肝细胞肝癌，全球HCV感染者近2亿，我国占4200万。HCV生活周期的首要步骤为利用细胞表面受体完成感染细胞的过程。近1年多来，项目申请人及其他研究团队相继报道了细胞紧密连接（Tight Junction）蛋白Claudin-1和Occludin是HCV进入宿主细胞的辅助受体。本研究是申请人前期工作的延续，将深入分析Occludin与HCV囊膜糖蛋白（E1，E2）和其他受体（CD81,SR-B1,Claudin-1）间的相互作用方式与机理；探索Occludin与Claudin-1的协同作用及其亚细胞定位对HCV感染的影响；根据目前发现的HCV四种受体设计多肽文库筛选决定HCV感染的受体表位，并进一步建立阻断病毒感染的方法。以上研究将为深入理解病毒的致病机理、建立小动物感染模型及筛选抗HCV药物奠定坚实的基础。

丙型肝炎病毒（HCV）是重要的人类病原体，其慢性感染常引起严重的肝病。HCV侵入宿主细胞是一个复杂的生物学过程，多种细胞受体及宿主因子参与其中，如CD81, SR-BI, CLDN1和Occludin等。病毒与受体之间的相互作用为研究新型抗HCV药物提供了重要的靶点。在本项目研究中，我们在深入研究HCV受体分子功能的基础上，通过筛选覆盖四种HCV已知受体的多肽文库的方法来发现并研究新型HCV侵入的多肽抑制剂。我们发现来源与受体CLDN1氨基末端穿膜区的18个氨基酸组成的多肽能够抑制HCV的感染，将其命名为CL58。与以往报道的来源于CLDN1细胞外环的多肽不同，CL58并不改变CLDN1的细胞紧密连接定位，其抑制HCV侵入的半数抑制浓度为2μM，而其半数细胞毒性浓度则大于有效剂量的100倍。研究表明，CL58发挥抗HCV活性的作用环节主要是病毒侵入的晚期步骤，特别是病毒膜融合过程。通过生物化学与细胞生物学等方法，我们证实CL58能够与HCV的包膜蛋白E1和E2相互作用。结论：本研究首次发现一类新型的抑制HCV侵入的多肽抑制物，这些发现不但扩展了我们对受体CLDN1介导HCV感染的生物功能的认识，同时也为新型病毒entry抑制药物的研发奠定了坚实的基础。本研究成果在国际著名期刊发表多篇原始创新性SCI论文，包括肝病研究领域排名第一的《Hepatology》，申请并获得中国发明专利授权1项。