喹诺酮类耐药菌在社区人群肠道中的定植状况和播散机制

Quinolones have been widely used in human medicine,agriculture and animal husbundary, which is driving the increase in antibiotic resistant bacteria colonized in human normal flora. Nowadays, the research on the prevalence of antimicrobial resistant microorganisms among healthy people in the community will provied new insight into understanding how the pathogenic bacteria become resistance to antibiotics in the clinical arena. The results of our former research show that some resistant bacteria have emerged in the gut flora of healthy people in the community. And the results of our preliminary experiment reveal the emergence of quinolone resistant Escherichia coli in the intestinal flora of healthy persons. The aim of the present study is to investigate the prevalence, antibiotic resistance mechanism, and dissemination mechanism of quinolone resistant bacteria in the gut flora of healthy people in the community via molecular techniques and epidemiological methods. Meanwhile, risk factors and duration for colonization with quinolone resistant bacteria will be also studied. The results of our study will contribute to the therapy of community acquired infections, and provide a pioneering research idea and a valuable reference for future researches on the prevalence of resistant pathogens colonized in healthy people in the community.

喹诺酮类抗生素广泛用于医疗、农业、畜牧业等领域，破坏人体微生态系统平衡，引起了耐药菌株的定植。当前社区人群微生态系统中耐药菌流行状况的研究已成为探索临床感染病原菌耐药形成和播散机制一个新的研究领域。我们的前期研究结果表明社区人群肠道中已存在有其他类型耐药菌株的定植；同时预实验结果也发现喹诺酮类耐药肠杆菌科细菌在健康体检人员的肠道中已有流行。本课题拟采用分子生物学技术，结合流行病学调查的方式以探讨喹诺酮类耐药细菌在社区人群肠道中的定植状况、耐药机制、传播机制，分析形成定植的危险因素，并监测该类耐药菌在社区人群肠道中定植持续的时间。研究成果将有助于阐明喹诺酮类耐药菌在社区人群肠道中的定植和播散机制，为社区获得性感染的治疗提供理论指导；同时也为以后开展社区人群微生态系统中其他耐药基因流行病学的类似研究提供新的思路和重要参考。

喹诺酮类抗生素的广泛使用对人体微生态系统的平衡势必造成负面影响，直接表现在会引起耐药菌株的定植。本研究主要探讨社区人群肠道微生态系统中喹诺酮类耐药菌的定植状况和耐药机制；同时与喹诺酮类耐药的临床分离菌株作对比研究，以其获得更全面的认识。研究以大肠埃希菌肠道分离株和临床分离株为研究对象，结果显示社区人群肠道中喹诺酮类不敏感大肠埃希菌分离率高达89.0%（382/429），PCR检测发现携带质粒介导喹诺酮类耐药基因（plasmid-mediated quinolone resistance，PMQR）的菌株比例为30.0%（120/429）。PMQR基因检测结果显示，健康人组PMQR阳性菌株中以qnr基因阳性菌株为主；临床组PMQR阳性菌株，以aac(6’)-Ib-cr阳性菌株为主。健康实验组和临床对照组的qnr基因均以qnrS为最流行的基因型。菌株同源性分析结果无论是肠道分离株还是临床分离株都不存在克隆播散。我们对肠道分离株中最为常见的PMQR基因qnr进行进一步研究，质粒接合试验结果显示携带qnr基因的质粒可通过质粒进行菌株间的水平传播，且质粒类型也具有多样性，此结果也显示出该类型耐药基因播散能力强的特点。此外，研究还发现喹诺酮类耐药菌株在在校大学生肠道菌群中定植持续时间很长（最长的超过120天），定植时间长也增加了此类耐药菌播散的几率。喹诺酮类耐药菌株往往表现出多重耐药的特征，尤以ESBL为常见，研究期间收集到了耐碳青霉烯类肠杆菌科细菌，我们也对其耐药机制进行了较为深入的研究，结果发现本地区耐药基因与以往国内其它地区报道的型别有很大的差别，揭示了多重耐药菌耐药基因具有区域多样性流行分布的特点。