探索无血清培养条件下人胚胎干细胞体外定向诱导组织工程皮肤

目前临床上使用的各种人工复合皮肤基本解决了大面积深度烧伤后创面覆盖问题，但因缺少正常皮肤的附属结构致排泄和体温调节等功能不足，并存在局部皮肤薄弱、抗拉及抗摩擦能力差等缺陷，严重影响患者的生活质量。因此构建具有皮肤附属结构如毛发、皮脂腺和汗腺的组织工程皮肤是当前国际上急待解决的重要问题。本课题将采用自行研制的血清替代品代替血清，建立一种安全、可靠、有效的无血清培养人胚胎干细胞的方法，可以避免动物携带的已知或未知病原体传染人类的隐患以及硅铝酸的污染；构建HOXA4-eGFP质粒转染hES细胞，用合适的培养条件诱导分化成皮肤干细胞，G418选择培养，能够筛选出较均一的皮肤干细胞，避免其它细胞混杂而引起畸胎瘤的危险；再将由hES来源的皮肤干细胞与人重组Ⅰ胶原海绵膜构建的人工复合皮移植到裸鼠的创口，观察人工皮肤在创口生长，促进创口愈合的能力，为克服目前人工复合皮的缺陷提供实验依据。