新型致癌因子CIP2A在HPV致宫颈癌发生发展过程中作用机制的初步研究

宫颈癌是妇科常见恶性肿瘤，其发生与HPV感染密切相关。然而，仅有HPV感染不能导致宫颈癌的发生，宫颈致癌机制仍有待深入研究。CIP2A是07年发现的新型致癌蛋白，目前人们对其致癌机制了解甚少。我们前期工作证实：CIP2A在宫颈癌组织中过表达，表达水平与HPV E6 E7相关；且CIP2A对于维持宫颈癌细胞的恶性表型有重要作用。本项目拟进一步明确CIP2A在宫颈CIN组织、癌变组织和细胞系中的表达状态；利用细胞转染和RNA干扰技术揭示CIP2A对宫颈癌细胞的恶性增殖、衰老、凋亡及裸鼠成瘤的影响；通过角质细胞转染、免疫共沉淀等技术验证E6 E7与CIP2A体内外相互作用，阐明E6 E7是否参与CIP2A致宫颈癌的过程。研究结果将初步揭示CIP2A在宫颈癌发生发展过程中的作用，深化HPV致癌分子机制研究，有望为宫颈癌早期筛选和诊断提供新标记物，为宫颈癌及其他HPV相关肿瘤提供新的治疗靶点。

宫颈癌是女性生殖系统最常见的恶性肿瘤之一，人乳头瘤病毒（HPV）的感染与其发生发展有密切关系，但是宫颈癌的致癌机制尚不十分清楚。我们利用免疫组化技术检测了宫颈正常组织、上皮内瘤变（CIN I、II、III级）组织、宫颈鳞状细胞癌及宫颈腺癌等人体组织中CIP2A的表达，结果显示新型致癌蛋白CIP2A可能参与了宫颈癌的发生发展。进而，我们通过小干扰RNA技术敲低宫颈鳞癌和腺癌细胞系Hela、SiHa、Caski中CIP2A的表达后，利用细胞增殖实验、克隆形成实验及软琼脂克隆形成实验、细胞周期、细胞凋亡及细胞衰老检测证实了CIP2A对于维持宫颈癌细胞的恶性表型有重要作用，但与细胞周期、凋亡和衰老无关,这可能是通过影响下游Wnt途径及其他相关蛋白如c-Myc后实现的。 .　　有趣的是，我们进而发现宫颈癌组织芯片中CIP2A的蛋白水平与HPV E7蛋白显著相关，利用免疫共沉淀、小干扰和质粒过表达技术我们证实HPV E7与CIP2A虽然不存在直接相互结合作用，但HPV E7可调控CIP2A的表达，其机制可能通过升高转录因子ELK1的表达，进而增强了其与CIP2A启动子区的结合，促进了CIP2A的mRNA和蛋白翻译。本项目研究结果初步揭示了CIP2A在宫颈癌发生发展过程中的作用，有望深化HPV致癌分子机制研究，为宫颈癌早期筛选和诊断提供新标记物。