夹氧杂蒽酮类化合物调控tRXRa介导的TNFa生死转换的作用机制研究

Early work show that CF31 inhibit tRXRa–mediated AKT activation,convert the TNFa signaling from survival to death by targeting tRXRa and kill the tumor cells. Our prelimilary results indicate when stimulated by TNFa,TNFR1 binds to tRXRa, and when treated with CF31,tRXRa binds to FADD, these results tell us tRXRa regulates the conversion of TNFa signal pathway from survival to death, and expresses its biological function during the process.This work will enhance our understanding of the fuction and role of tRXRa in tumor cells and clarify its biological effect,this may also help us to find a new therapeutic method based on the tRXRa and provide a theoretical basis about the discovery of the anti-cancer drugs which targets tRXRa.

前期工作表明，夹氧杂蒽酮类化合物CF31能够负性调控tRXRa/PI3K/Akt生存通路，将TNFa信号转导通路从生存通路转换成死亡通路，进而杀死肿瘤细胞。最近发现，在TNFa的刺激下，TNFR1能够与tRXRa相互作用；而在特异性配体CF31的作用下，tRXRa则与DISC的重要组成蛋白FADD发生相互作用。由此我们认为，tRXRa调控了TNFa信号转导通路的生死转换、并在这种转换过程中发挥其生物学功能。本课题的开展将有利于揭示tRXRa在肿瘤细胞中的功能及机制，阐明tRXRa在转换TNFa生存-死亡通路中所发挥的生物学功能，发现基于tRXRa癌蛋白的新的治疗靶点和方法，为以tRXRa为靶点的抗肿瘤药物开发提供理论依据。

利用以夹氧杂蒽酮类化合物CF31为代表的数个天然小分子化合物，对核受体tRXRα、RXRα及Nur77参与TNFα信号传导通路的生死转换进行了深入研究，结果发现：（1）化合物YZ-3诱导肿瘤细胞中Nur77蛋白表达及其细胞质中的线粒体定位。但与其他凋亡诱导剂不同，YZ-3诱导产生的细胞质Nur77需要细胞中Bcl-2蛋白的表达，且不被LMB抑制，说明YZ-3介导的Nur77的细胞质定位可能通过一种新的机制产生。（2）化合物CF-31与TNFα的联合用药效果明显，肿瘤细胞的敏感性会增加、细胞凋亡变得明显。在TNFα的刺激下，TNFR1能够与tRXRα相互作用；而在特异性配体CF31的作用下，tRXRα与DISC的重要组成蛋白FADD发生了相互作用；另外，tRXRα与TRAF2也有明显的相互作用，且该作用随TNFα量的增加而增强；而CF31可以减弱TNFα促进的TRAF2与tRXRα的相互作用；tRXRα能够增强TNFα诱导的TNFR1与TRAF2的相互作用、并且这种作用呈浓度依赖性。在tRXRα存在时，CF31减弱TNFα诱导的TNFR1与TRAF2的相互作用更明显。（3）在乳腺癌细胞中，TNFα能够强烈并快速地诱导Nur77的表达，并且被诱导的Nur77主要定位在细胞核内；我们通过体内的动物实验以及临床病人的样品分析发现，TNFα诱导的Nur77在乳腺癌细胞中扮演者存活因子的角色；我们发现和厚朴酚在TNFα的存在下，可以通过抑制Nur77的表达来使乳腺癌细胞变得敏感、诱导其凋亡；和厚朴酚在TNFα的存在下抑制了TNFR1与RIP1的相互作用、但对TNFR1与TRAF2的相互作用没有影响。（4）化合物Apaensin通过激活JNK和p38MAPK这一独特方式靶向Nur77，诱导肿瘤细胞通过Nur77-Bcl-2凋亡通路走向死亡。通过以上的研究，已经在Carcinogenesis、Oncotarget、British Journal of Pharmacology等SCI杂志上发表论文3篇，研究结果表明，这些天然成分通过靶向核受体RXRα和/或Nur77受体信号通路，促进了TNFα信号转导通路的生死转换，有可能发展成为选择性作用于核受体的抗肿瘤的先导物。