Endoglin适配体靶向异源基因疫苗抗肿瘤研究

适配体是一段能与相应的配体高特异性和高亲合力结合的核酸序列，从原始文库中筛选配体相应的适配体技术称SELEX技术。Endoglin是肿瘤血管生成的标志性分子之一。异种移植时引发超急性排斥反应的异种（如猪）器官血管内皮细胞上的抗原靶分子均由α1,3GT（一种转移酶）催化合成，而猴与人类无α1,3GT表达。本研究在已完成的国家自然基金课题"超急性排斥反应靶向抗肿瘤自杀基因疫苗研究"基础上，继续根据超急性排斥反应机理，运用SELEX技术从随机ssDNA文库中筛选出能与Endoglin特异结合且无免疫原性的适配体，将其与经纳米脂质体、PEG修饰的猪α1,3GT 基因mini.gDNA重组子交联成PILs，转染猴肿瘤血管内皮细胞，完成体外实验。由PILs将该重组子靶向导入荷乳腺癌猴体内，以研究该基因在猴体内肿瘤血管内皮细胞上的表达和伴随的α-Gal抗原肽的表达及其诱导的超急性排斥应抗瘤效应。

本研究运用肿瘤新生血管内皮细胞Endoglin分子的适配体将猪α1,3GT基因靶向肿瘤研究其抗癌效应。采用SELEX技术筛选出肿瘤血管生成的标志性分子Endoglin的适配体。用猴乳腺癌细胞MELIII建立猴肿瘤模型，人乳腺癌细胞MCF7和肺癌细胞A549建立重构人免疫系统的SCID鼠肿瘤模型（正如先前进展报告所述，由于猴肿瘤模型成本昂贵，本研究在后期实验中采用了前期研究重构人免疫系统荷瘤SCID鼠代替荷瘤猴动物模型）。由Endoglin的适配体靶向纳米脂质体载体PILs将能表达猪α1,3GT基因mini.gDNA重组子转染重建了人免疫系统的SCID鼠A549肺癌动物模型的肿瘤新生血管内皮细胞，完成体外转染实验与相关研究。由Endoglin将α1,3GT基因mini.gDNA靶向导入荷肺癌动物体内，以研究该基因在体内肿瘤新生血管内皮细胞上的表达和伴随的α-Gal抗原肽的表达及其诱导的超急性排斥反应抗癌效应。结果发现，荷瘤动物的肿瘤体积明显缩小，荷瘤动物生存时间得以延长，显示出了靶向异源基因诱导的体内抗肿瘤效应。因此，本研究所取得的主要研究成果是：猪α-1,3GT mini-gDNA基因靶向抗肿瘤疫苗能在荷瘤体内诱导出与其体外相似的超急性排斥反应抗肿瘤效应，有可能作为一种人类抗肿瘤自杀基因疫苗应用于临床。已经申请了1项发明专利。部分相关的研究成果发表在Clinical Cancer Research等杂志上。