炎症相关性miRNA在胃黏膜相关淋巴组织淋巴瘤发病中的作用及机制研究

胃黏膜相关淋巴组织(MALT)淋巴瘤是胃最常见的肿瘤之一，发病率逐年上升，慢性炎症在该肿瘤发病中起着重要作用，抗幽门螺杆菌治疗只能治愈部分早期病人，仍有一些病人治疗反应差，预后不良。本研究在前期工作中分析了胃MALT淋巴瘤miRNA表达谱特征，发现肿瘤组织与瘤旁组织中3个差异表达miRNAs涉及炎症相关因子的调控，具有重要研究价值。进一步对28例胃MALT淋巴瘤进行定量PCR检测和临床随访，发现肿瘤组织表达的3种炎症相关miRNA与预后关系密切。由此认为这些炎症相关性miRNA在胃MALT淋巴瘤发病中具有重要的作用，本研究拟进一步通过生物信息分析，应用定量PCR、基因操作、免疫组化、Westernblot和RNA干扰等技术，分别在体外及裸鼠移植瘤模型中，确定炎症相关性miRNAs在胃MALT淋巴瘤发病中的作用及机制，进一步通过临床病例分析加以确认，以细化临床病理分型，寻找诊断治疗的新靶点。

课题揭示了miR-378、miR-100、miR-155尤其是microRNA-34a对MALT和DLBCL发生发展的重要影响及其涉及的可能机制，提示通过miR相关研究发现新的靶蛋白，用于疾病进展或预后预测，辅助新的病理分型是行之有效的方法。课题还研究了地西他滨单用或联合联合硼替佐米对不敏感的Notch1突变的T-ALL生长抑制作用及其详细机制，提示临床治疗耐药T淋巴细胞白血病有效的干预措施。1、胃MALT淋巴瘤中肿瘤组织与瘤旁组织之间microRNA表达谱差异性筛选、与临床症状体征关联性及其机制研究：发现胃MALT淋巴瘤中，miR-378肿瘤组织表达较瘤旁组织高，miR-378表达和患者胃溃疡的发生有关，可能通过调控靶基因MMP14、MAPK1蛋白表达来实现；HP感染增加了miR-100基因的表达，激活了TNFAIP8、SMARCA5基因表达，导致淋巴瘤的发生；miR-155对于患者肿瘤侵袭性有关。2、miR-34a 下调以及FOXP1、p53和 BCL2 的共表达提示MALT和DLBCL 患者临床预后较差 发现MALT淋巴瘤和DLBCL淋巴瘤组织中miR-34a的表达水平显著降低，DLBCL组织中miR-34a的表达较MALT更低。MALT和DLBCL中FOXP1、p53、BCL2阳性率均比较高，晚期患者肿瘤组织表达较早期患者显著高；三种分子的阳性率与不良总体生存率相关。MALT中miR-34a和BCL2阳性评分高于DLBCL患者，BCL2+ FOXP1-p53- MALT患者总生存显著优于BCL2-FOXP1-p53-MALT患者，也显著优于BCL2+FOXP1-p53-DLBCL患者；FOXP1, p53和BCL2 共表达是MALT和DLBCL独立的预后因素。3、明确单用或联合地西他滨对硼替佐米不敏感的Notch1突变的急性T-ALL生长抑制作用及其机制。发现地西他滨与硼替佐米两药联用比单药抑制作用更明显，Pax5 、Sfrp2、Sulf1基因表达较用药前升高，Pax5 启动子CpG 岛甲基化率减少。Molt4细胞内过表达Pax5，细胞增殖活力下降。Notch1下游蛋白Hes1表达量减少而凋亡相关Caspase3、Caspase9表达量增加。提示地西他滨联合硼替佐米可能是促进了Pax5的高表达，抑制T细胞特异性的Notch1信号通路，从而抑制肿瘤生长。