PrPc-Rab5互作调控牛肺泡巨噬细胞吞噬性融酶体膜融合的分子效应

已有鼠骨髓巨噬细胞模型研究显示，结核病持续感染期结核分枝杆菌表达的一些关键基因及其产物是形成和维持持续感染的可能机制之一,但目前缺乏充分确凿的研究数据对其分子机制予以证实，基础性问题亟待解决。本研究旨在利用比较蛋白质组学、基因表达谱测定技术和细胞生物学方法探索牛PrPc-Rab5介导牛分支杆菌吞噬性溶酶体膜融和的分子调控机理；通过牛分枝杆菌肺泡巨噬细胞持续感染模型，构建Rab5过表达载体，借助膜蛋白PrPc的介导作用，于生长液条件下拟实现和牛肺泡巨噬细胞转染，利用Real-time PCR、2-DE电泳、飞行质谱、共聚焦显微技术、重组蛋白抗体和免疫电镜技术分析确定持续感染中关键基因表达水平和蛋白质差异显示;进而对结核病持续感染中吞噬性溶酶体膜融和分子调控效应进行理化分析，解析结核病分子致病机理和传播机制。最终为建立牛结核病新型特异敏感性诊断方法、净化技术及防制方案提供理论依据和重要线索。