miRNA在Burkitt 淋巴瘤中的表达和分子机制研究

miRNA在癌症的发病机制、早期诊断以及寻找新的治疗策略方面都有重要意义。申请人具有研究miRNA在淋巴瘤中的表达及其分子机制的丰富经验。本研究将进一步在Burkitt 淋巴瘤（BL）和正常淋巴组织的临床标本中，采用miRNA芯片，比较BL与正常淋巴组织的miRNA表达谱，并且利用qRT-PCR和miRNA原位杂交的方法将芯片筛选出的miRNA进行精确的定量和定位分析，明确在BL中特异性表达的miRNA。在BL、弥漫大B细胞淋巴瘤（DLBCL）及介于DLBCL和BL中间特点的B细胞淋巴瘤三类淋巴瘤临床标本中，研究这些miRNA的差异性表达，从而揭示miRNA在BL鉴别诊断中的作用。在BL细胞株模型上, 利用转染技术改变miRNA的表达，研究细胞生物学特征的改变，探索miRNA药物对BL的治疗价值。该研究对揭示BL发生发展的分子机制、临床早期诊断、鉴别诊断及合理治疗方法的探索具有重要意义。

本研究基本按照计划完成，同时其中的研究工作有一定的调整。共发表中文核心期刊1篇，2篇SCI文章，目前一篇SCI文章投稿中。.按照计划完成的研究结果如下：1）比较BL与正常淋巴组织的miRNA表达谱，在183个 miRNAs中，86 miRNAs 在in BL and 正常淋巴组织中表达. 我们继续分析了15个在BL中高表达的miRNAs. 9个miRNAs（ miR-150,miR-142-3p,miR-342,miR-25,miR-15b,miR-92,miR-16,miR-21 和 miR-93 ）在 BL中低表达，而6 miRNAs（ miR-127，miR-30c，miR-17-5p，miR-181b，miR-146 和 miR-34a） 在 BL中高表达。利用qRT-PCR和miRNA原位杂交的方法将芯片筛选出的miRNA进行精确的定量和定位分析，发现miR-150在Burkitt淋巴瘤中特异性低表达。但是，miR-150的表达与EBV的感染状态无关；2）在BL细胞株模型上, 利用转染技术改变miR-150的表达，发现miR-150可抑制Burkitt淋巴瘤的增殖，并且westernblot与免疫组化证明，miR-150的靶蛋白是c-myb与survivin，此研究探索了miRNA药物对BL的治疗价值。.研究工作的调整：1）比较基因组杂交检测Burkitt淋巴瘤及与临床的关系：结果表明90.5%的BL病例存在染色体水平的改变，并且染色体的扩增多于缺失。大部分BL病例存在14q的大片段的DNA的缺失与获得，表明BL的发病机制可能与14q的染色体基因的改变关系密切。2）ALK与MYCN基因在儿童神经母细胞瘤中的作用及预后分析：我国儿童神经母细胞瘤中MYCN扩增率较低（11.0%）； ALK蛋白表达与NB分化程度、患者年龄、INSS分期及发病部位无明显相关性。患者诊断时年龄大于18个月、进展期肿瘤（III、IV期）、MYCN扩增、ALK扩增及ALK蛋白阳性均为预后不良因素。.在项目的研究过程中，课题负责人培养了独立主持科研项目、进行创新研究的能力，激励了创新思维，并且为以后的科研打下了坚实的基础，并且培养硕士研究生3名，培育基础研究后继人才。