树突细胞表面CLRs/TLRs受体平衡失调和Treg/Th17细胞在URSA发病中的作用

妊娠成功与否有赖于母胎免疫耐受的调控，而原因不明复发性流产（URSA）则由于这种耐受失调所致。新近研究表明，树突状细胞(DC)表面的CLRs受体激活诱导免疫耐受，而TLRs受体激活则诱导机体的获得性免疫反应，且CLRs和TLRs之间的"对话"参与调节免疫耐受平衡；如果TLRs活性超过CLRs活性可激活免疫反应，导致免疫耐受状态被打破。因此，URSA发病过程中DC表面CLRs和TLRs之间活性平衡是否失调，及这种失调对Treg/Th17细胞平衡和母胎免疫耐受的影响，是一个非常值得探讨的课题。本课题拟研究：①检测URSA患者与正常孕妇的母胎界面中DC表达CLRs和TLRs水平的差异；②通过干扰使DC表面CLRs和TLRs之间活性平衡失调，是否导致Treg/T17细胞平衡和母胎免疫耐受失调；③动物实验研究CLRs优势mDC是否能发生流产发生，TLRs优势mDC是否会诱导流产发生。

妊娠成功有赖于母胎免疫耐受的调控，而原因不明复发性流产（URSA）则由于这种耐受失调所致。新近研究表明，树突状细胞(DC)表面的CLRs受体激活诱导免疫耐受，而TLRs受体激活则诱导机体的获得性免疫反应，且CLRs和TLRs之间的“对话”参与调节免疫耐受平衡；如果TLRs活性超过CLRs活性可激活免疫反应，导致免疫耐受状态被打破。本课题研究URSA发病过程中DC表面CLRs和TLRs之间活性平衡是否失调，及这种失调对Treg/Th17细胞平衡和母胎免疫耐受的影响。.本课题的研究结果显示：.①URSA患者蜕膜中DC表达的DC-SIGN水平降低，TLR-2/4水平升高，MR水平无明显差异；DC与T细胞共培养，分泌的Th1细胞因子（IL-2和IFN-γ）水平升高，Th2细胞因子（IL-10和TGF-β1）水平降低；URSA患者蜕膜中的Th17细胞数量高于正常妊娠孕妇，Treg细胞数量低于正常妊娠孕妇，Th17细胞数量与TLR-2/4水平成正相关性，Treg细胞数量与DC-SIGN水平成正相关性。.②通过基因转染和siRNA获得“CLRs优势”DC和“TLRs优势”DC。“CLRs优势”DC+T细胞共培养上清液中IL-2和IFN-γ的水平低于“TLRs优势”DC+T细胞共培养，IL-10和TGF-β1水平高于“TLRs优势”DC+T细胞共培养，提示“TLRs优势”DC能够诱导Th1型反应；“CLRs优势”DC能够诱导Th2型反应。.“CLRs优势”DC与初始T细胞共培养，诱导生成的Treg细胞数量显著高于“TLRs优势”DC，平衡向Treg偏离；“TLRs优势”DC与初始T细胞共培养，诱导生成的Th17细胞数量显著高于“CLRs优势”DC，平衡向Th17偏离。.③与注射“TLRs优势”mDC的流产孕鼠相比较，注射“CLRs优势”mDC的流产孕鼠蜕膜中Treg数量上升，Th17细胞数量下降，流产孕鼠胚胎丢失率显著下降。提示“CLRs优势”DC能够诱导流产母鼠体内Treg细胞增多、平衡向Treg偏离，防止流产发生。.与注射“CLRs优势”mDC的正常妊娠孕鼠相比较，注射“TLRs优势”mDC的正常妊娠母鼠蜕膜中Treg数量下降，Th17细胞数量上升，正常妊娠母鼠的胚胎丢失率显著上升。提示“TLRs优势”DC能够诱导Th17细胞增多、平衡向Th17偏离，促进流产发生。