Apicidin启动成熟脂肪细胞去分化的分子信号机制研究

肥胖已成为全球性的健康问题,生理情况下的肥胖，主要是基于脂肪细胞体积的增大。目前针对脂肪细胞体积调控的相关研究，主要围绕着成脂分化的调控机制，却忽视了一个潜在的重要领域- - 脂肪细胞的去分化。前期研究中，我们发现了成熟脂肪细胞的去分化现象，并针对去分化脂肪细胞成脂分化过程中的基因变化进行了检测。更重要的是，我们成功应用低浓度apicidin启动了脂肪细胞的去分化。本研究将围绕脂肪细胞的去分化调控而展开，采用细胞提纯、诱导去分化及再分化、基因和蛋白检测等方法，及基因芯片、RT-PCR、Western-blotting等技术手段，重点研究apicidin启动成熟脂肪细胞去分化过程中，细胞内部的分子信号通道的变化及相关机制，阐明apicidin干预脂肪细胞去分化的具体信号机制，探讨apicidin促使脂肪细胞去分化时安全、有效的药物浓度，为其作为一种新的非手术治疗肥胖的方法垫定实验室理论基础。

在这个项目中，我们完善并标准化了整个去分化脂肪细胞的原代培养方法。改善了原有的方法，提高了去分化脂肪细胞原代培养的成功率和效率。测定了apicidin对去分化脂肪细胞作用的安全有效浓度。观察了apicidin不同浓度下在脂肪分化和去分化的各个阶段的形态学变化及脂滴的油红O定量检测。分析了Apicidin对脂肪分化和去分化过程中，部分对脂肪分化起关键作用的基因，如PPARγ, SREBP1C, CEBPa, CEBPb, GATA4, C-MYC, 4-OCT, SOX2, TBX1, KLF4, NANOG, SOX17。其中发现，C-MYC在apicidin诱导成熟脂肪细胞去分化过程中起着关键作用。虽然之前有文献报道C-MYC有抑制脂肪分化的作用，但C-MYC诱导脂肪去分化得做用尚属首次发现。