Ghrelin及其受体对小肠运动的调控和机理研究

新近发现的脑肠肽ghrelin，具有促进摄食、调节胃肠运动、保护胃粘膜等作用。然而，关于ghrelin的研究并不深入具体，对于其促小肠动力的机制及脑肠轴通路尚不清楚，对其受体的信号转导通路也未阐明。本项目拟采用细胞培养、双电极埋置技术、激光共聚焦等技术对ghrelin及其受体GHS-R对小肠运动的作用和机制进行深入研究，包括：（1）GHS-R在分离培养的脑神经元、肠神经元的信号转导机制；（2）静脉和中枢给予ghrelin对小肠消化间期移行性复合运动(MMC)的作用及机制；（3）静脉和中枢给予ghrelin对中枢和小肠的神经激活。旨在明确ghrelin受体后机制，阐明ghrelin对小肠运动的作用及脑肠轴神经通路，为进一步深入研究ghrelin提供理论依据，为开发促胃肠动力药物及胃肠动力障碍性疾病的治疗提供线索。

背景：脑肠肽ghrelin的生物学作用十分广泛，可促进摄食、调节胃肠运动、保护胃粘膜。然而，目前对其受体的信号转导通路尚未阐明，对于其促小肠动力的机制及脑肠轴通路尚不清楚。主要内容：本项目采用细胞培养、双电极埋置技术、激光共聚焦等技术就ghrelin及其受体GHS-R对小肠运动的作用和机制进行深入研究，观察了：（1）GHS-R在分离培养的脑神经元、肠神经元的信号转导机制；（2）静脉和中枢给予ghrelin对小肠转运及小肠消化间期移行性复合运动(MMC)的作用及机制；（3）静脉和中枢给予ghrelin对中枢和小肠的神经激活。重要结果及数据：（1）分离培养出脑神经元和肠神经元，观察到GHS-R和ghrelin在神经元均有表达。Ghrelin可使神经元内Ca2+浓度明显升高，无钙细胞外液和维拉帕米预处理细胞后，ghrelin可轻度升高胞内Ca2+浓度。Ghrelin抗血清、G蛋白拮抗剂NEM及PLC抑制剂Compound 48/80预处理细胞后再加入ghrlein，胞内Ca2+升高程度明显降低。D-鞘氨醇对ghrelin所致的胞内Ca2+浓度的升高作用没有显著影响。（2）静脉和中枢给予ghrelin剂量依赖性促进小肠转运，其受体拮抗剂(D-Lys3)GHRP-6抑制ghrelin的作用。（3）静脉和中枢给予ghrelin促进胃肠MMC，静脉给予阿托品、L-精氨酸、昂丹司琼或(D-Lys3)GHRP-6抑制静脉注射ghrelin的作用；静脉给予阿托品，中枢给予(D-Lys3)GHRP-6或NPY抗体均可抑制中枢注射ghrelin的作用；静脉给予酚妥拉明和普萘洛尔均未抑制静脉和中枢注射ghrelin的作用。（4）静脉和中枢注射ghrelin后，血浆胃动素周期性波动规律不受影响，各相应时相胃动素浓度与ghrelin作用前比无显著性差异。（5）静脉和中枢注入ghrelin激活胃肠道和中枢的c-Fos蛋白，ghrelin受体拮抗剂的应用抑制了ghrelin对c-Fos的激活。意义：明确了ghrelin受体后机制，阐明ghrelin对小肠运动的作用及脑肠轴神经通路，为进一步深入研究ghrelin提供理论依据，为开发促胃肠动力药物及胃肠动力障碍性疾病的治疗提供线索。