蛋白C系统在新疆地区维吾尔族、哈萨克族、汉族心房颤动合并血栓栓塞中的作用及机制研究

Thromboembolic complications is one of the biggest dangers of atrial fibrillation,and is the most important cause for morbidity and mortality death in atrial fibrillation.Pathogenesis of nonvalvular atrial fibrillation with thromboembolism is unclear,recent evidence suggests that genetic factors play an important role in its pathogenesis.Genetic polymorphism-related alteration in concentration or activity of protein C system,one of the important path of anticoagulant system, is associated with thrombosis.Our previous studies have found that gene polymorphisms regulating S protein in protein C system is associated with thrombosis in nonvalvular atrial fibrillation,whereas lacking is evidence on other pathways (protein C,thrombosis,regulatory proteins TM,endothelial cell protein C receptor EPCR) relaed to thrombus in nonvalvular atrial fibrillation.This study further focuses on genetic polymorphisms of protein Csystem in thrombosus copuled with nonvolvular atrial fibribillation among Uygur, Kazakh and Han Chinese using Taqman methods.On the basis of the use of a technique called RNA interference silence is strong associated SNPS,DNA microarray technology is used to inspect the above gene silencing cells after the change of gene expression profile,find the genes related to the above mentioned gene regulatory network,from the level of gene and molecular reveal the protein C system gene mutations in the effect and mechanism of atrial fibrillation thrombosis occurs.

血栓栓塞并发症是房颤最大危害之一，也是临床房颤患者致残、致死的最重要原因。非瓣膜性房颤合并血栓栓塞的发病机制尚未完全阐明，有证据表明遗传因素在其发病机制中有重要作用。蛋白C系统作为抗凝系统重要路径之一，其相关基因多态性所致蛋白浓度或活性变化与血栓形成有关联。我们前期研究发现蛋白C系统中调节S蛋白基因多态性与非瓣膜性房颤合并血栓栓塞有关联，尚缺蛋白C系统其他途径与非瓣膜性房颤合并血栓栓塞的关系。本项目拟在前期研究基础上，利用高通量TaqMan基因分型技术研究蛋白C系统基因多态性与维吾尔族、哈萨克族及汉族房颤合并血栓栓塞的关系及其差异；利用分子生物学手段及免疫细胞化学方法研究蛋白C系统基因在房颤合并血栓栓塞人群组织及血液中的表达；再利用基因沉默及过表达技术在细胞水平上验证其功能，揭示蛋白C系统基因在新疆地区不同民族房颤合并血栓栓塞发生、发展中的作用及其机制，以期为个体化诊断和基因治疗打下基础。

血栓栓塞并发症是房颤最大危害之一，也是临床房颤患者致残、致死的最重要原因。非瓣膜性房颤合并血栓栓塞的发病机制尚未完全阐明，有证据表明遗传因素在其发病机制中有重要作用。蛋白C系统作为抗凝系统重要路径之一，其相关基因多态性所致蛋白浓度或活性变化与血栓形成有关联。为进一步阐明蛋白C系统在房颤合并血栓栓塞形成中的作用机制，本项目中，我们首先通过对房颤以及房颤合并血栓栓塞患者进行外显子、内含子以及启动子区域直接测序，发现TM 基因 rs1962、PS基因 rs1800807、PS基因rs1800808位点在两个组中具有显著差异，TM基因rs1962位点AA 因型可能是房颤患者发生血栓的保护因素，PS 基因rs1800807位点GG基因型、rs1800808位点CT基因型可能 是房颤患者发生血栓的危险因素；进一步发现血浆 s-PS浓度与PS基因型相关，同一基因型的s-PS浓度存在种族差异。rs1800807突变GG基因型和rs1800808杂合CT基因型和突变TT基因型的血浆sPs水平均显著增高，提示汉族、维吾尔族和哈萨克族人群血浆sPs浓度与 Ps 基因型有关。并且，在细胞水平沉默TM 基因，发现其低表达可以导致血管内皮细胞生长收到抑制，且促进了细胞凋亡，同时其可能通过上调 vWF、NO表达水平从而促进血小板黏附于受损血管内皮上，而P-selectin上调可增加血小板聚集能力，故TM低表达可能促进血管中血栓形成。与此同时，TM通过下调ZO-1、Tie-2、MMP-2、EPCR蛋白的表达影响血管内皮细胞功能，在血栓形成中发挥作用。最后，通过转录组测序结果我们推测TM可能通过MAPK信号通路激活细胞 自噬导致内皮细胞功能失调。本项目利用全基因组测序、转录组测序等分子生物学技术对该基因进行深入研究，从基因及分子水平揭示该基因在房颤合并血栓栓塞发生中的作用及其分子机制，对房颤患者发生血栓栓塞的诊断和个体化的基因治疗具有一定的指导意义，并为今后临床治疗与预防奠定理论基础。