表面活性剂/聚合物双水相体系中内在膜蛋白分配特性研究

以非离子型表面活性剂为主要研究对象，研究表面活性剂/聚合物双水相体系成相特性及内在膜蛋白萃取分配特性，并建立蛋白质在双水相中分配模型，以期为强疏水性内在膜蛋白预分离处理技术提供基础理论与关键技术支撑。(1)研究多种类型非离子型表面活性剂/聚合物双水相成相特性，确定一批成相性能稳定、对内在膜蛋白具有良好富集能力的双水相体系；(2)研究不同种类疏水性内在膜蛋白和亲水性蛋白在表面活性剂/聚合物双水相体系中的萃取分配特性，对双水相中胶团结构进行表征，分析萃取主要作用力和萃取机理；(3)建立表面活性剂/聚合物双水相体系中蛋白质分配模型，在不同物况下对复杂蛋白质物系中内在膜蛋白预分离过程进行设计和优化。本项目的研究对表面活性剂类双水相体系的深入开发及内在膜蛋白分离、分析具有重要意义。

结合膜蛋白质组学中对低丰度、强疏水性内在膜蛋白分离纯化的技术需求，开展表面活性剂/聚合物双水相体系中内在膜蛋白分配特性研究，获得一批具有普适性分离纯化内在膜蛋白的双水相体系。项目以非离子型表面活性剂为主要研究对象，研究表面活性剂/聚合物双水相体系成相特性及内在膜蛋白的富集分离特性，并建立蛋白质在双水相中分配模型，为强疏水性内在膜蛋白预分离处理技术提供基础理论与关键技术支撑。主要研究内容有：(1)研究Triton、Tween系列等多种类型非离子型表面活性剂与聚乙二醇、葡聚糖等聚合物双水相体系的成相特性，确定一批成相性能稳定、对蛋白质分配具有良好富集能力的双水相体系；(2)研究了以溶菌酶、牛血清白蛋白、胆固醇氧化酶等为代表的不同种类亲水性蛋白和疏水性内在膜蛋白在表面活性剂/聚合物双水相体系中的萃取分配特性，对双水相中胶团结构进行表征，分析萃取主要作用力和萃取机理；(3)分析蛋白分配过程中的疏水间相互作用力和空间位阻相互作用力，构建了表面活性剂/聚合物双水相体系中蛋白质分配模型，以嗜盐菌所产的蛋白体系为研究对象，对目标膜蛋白视紫红质的分离过程进行设计和优化，考察了表面活性剂/聚合物双水相体系对实际膜蛋白质物系的分离纯化特性。项目研究期间申请国内发明专利1项，发表论文8篇，其中SCI期刊论文4篇。这一工作对表面活性剂类双水相体系的应用拓展及内在膜蛋白分离、分析具有重要意义。