p16基因特异性人工转录因子的功能和作用机制

p16等肿瘤抑制基因在多种恶性肿瘤中呈甲基化失活，目前逆转这种失活基因的表观遗传治疗药物没有基因选择性。为探索甲基化p16基因特异性的活化方法，我们在前期工作中获得了一组对该基因启动子序列具有特异性结合能力人工锌指蛋白，与转录活化域VP64融合后，进一步筛选出了具有激活p16基因启动子活性的人工转录因子。.在本项目中，我们拟在获得具有激活甲基化失活p16基因的人工转录因子基础上，再利用染色质共沉淀和cDNA芯片等技术，对其激活p16基因表达的特异性和影响下游基因表达等情况进行研究；在培养细胞模型和动物模型上，对这些转录因子影响p16甲基化和非甲基化肿瘤细胞生长和转移的能力开展功能比较研究；同时探讨各种给药途径的有效性和安全性，为开发甲基化失活基因特异性的新型转录治疗药物提供实验依据。