具有pH敏感型隐形外壳的共转运抗肿瘤药物与siRNA的超分子组装体的制备与评价

本项目通过二硫键将阿霉素键合到阳离子型树枝状聚合物PAMAM的氨基端，再通过静电组装，与针对多药耐药相关基因的siRNA分子形成复合物"PAMAM-SS-DOX/siRNA"；通过琥珀酸酐对壳聚糖进行酰胺化修饰，制备等电点为7.0的壳聚糖衍生物ATC，并通过超分子组装法对上述复合物进行表面修饰，构建具有pH敏感型隐形外壳的肿瘤靶向型超分子组装体ATC(PAMAM-SS-DOX/siRNA)。该超分子组装体不仅能有效降低载体表面的调理作用，延长其在体内的循环时间，同时，可利用肿瘤组织低pH环境改变ATC外壳所带电荷，使其从载体表面脱离；无ATC外壳的复合物经胞吞进入细胞，胞内高浓度的谷胱甘肽促发键合到载体上的阿霉素与siRNA释放，从而发挥化疗药物及siRNA功效。本项目构建一类共载药物与siRNA的新型"核/壳"型肿瘤靶向型制剂，对于解决肿瘤细胞的多药耐药性及阐明肿瘤靶向机制具有重要意义。

本项目通过琥珀酸酐对壳聚糖进行酰胺化修饰，制备等电点为7.0的壳聚糖衍生物ATC，该衍生物能够有效实现对肿瘤低pH环境的响应，以PEN为模型，该隐形外壳能够在低pH条件下解离，提高基因传输效率，即实现对基因传输体系的有效遮蔽。利用二硫键将阿霉素键合到阳离子型树枝状聚合物PAMAM的氨基端，在10mMDTT存在条件下，药物释放速率明显提高，实现药物在胞内高还原力条件下的有效释放。通过静电组装的策略，与针对多药耐药相关基因p-gp和Bcl-2的siRNA分子形成复合物“PAMAM-SS-DOX/siRNA”，该复合体不仅能够实现对药物的高效递送，同时能够高效降低靶基因的表达量。通过超分子组装法，利用隐形外壳对上述复合物进行表面修饰，构建具有pH敏感型隐形外壳的肿瘤靶向型超分子组装体ATC(PAMAM-SS-DOX/siRNA)。以肺癌移植瘤为模型，该超分子组装体能够高效抑制肿瘤的生长，同时对小鼠体重没有影响，在展示良好的体内抑瘤效果的同时具有良好的生物相容性。该超分子组装体能够实现对肿瘤微环境低pH和胞内还原力的高度响应，进行化疗药物与基因的释放，发挥药物与基因的双重作用。本项目构建一类共载药物与siRNA的新型“核/壳”型肿瘤靶向型制剂，对于解决肿瘤细胞的多药耐药性及阐明肿瘤靶向机制具有重要意义。