电针调控PirB信号通路促进脑缺血后神经功能恢复的研究

如何治疗中风后神经功能障碍是一个亟待解决的世界性难题。我们首次发现电针刺激百会穴可显著减轻脑缺血损伤，改善神经功能障碍，且电针治疗中风的疗效不容置疑，方法安全可靠，但其机制有待进一步阐明。新近发现配对免疫球蛋白样受体B(PirB)是一个更为重要的髓磷脂抑制因子功能受体，我们的研究发现，脑缺血后PirB在缺血半暗带的神经元表达明显增加，电针刺激百会穴可抑制PirB表达上调，提示PirB参与脑缺血后神经元的损伤与修复以及电针保护效应。基于这一发现，本项目将选择大鼠MCAO及离体OGD模型，应用电针刺激结合多重免疫荧光染色、RNAi、基因转染、2-DE/MALDI-TOF-MS等技术，研究PirB在缺血再灌注后不同时间点的表达、含量的变化及其在轴突再生中的作用，并筛选PirB介导的关键分子，为轴突再生机制和电针治疗中风提供新的学术见解和新的理论依据，也为中风后轴突再生和功能恢复提供新的治疗靶点。

针刺或电针刺激治疗脑中风后遗症疗效确切，但其机制有待阐明。本项目采用功能、形态和分子生物学等综合方法，研究新发现的髓磷脂抑制因子的功能受体PirB在电针治疗脑缺血损伤中的调控作用及其分子机制。我们的结果发现：发现PirB在缺血再灌注后2h开始显著升高，并持续到再灌注7d，双重免疫荧光染色证实PirB主要表达在神经元参与神经元损伤与轴突再生。电针刺激百会穴能够明显抑制缺血引起的脑内PirB上调，进而促进轴突再生，改善动物的神经功能缺陷。上述结果表明：电针通过抑制PirB上调促进轴突再生而改善脑缺血损伤的神经功能缺陷。进一步依据生物信息学，我们首次构建PirB胞外多肽(PirB extracellular peptides, PEP)，表达并获得穿过血脑屏障的TAT-PEP融合蛋白，证实TAT-PEP能够拮抗髓磷脂抑制因子（Nogo-A、MAG、OMgp）与PirB结合，促进轴突生长与神经功能恢复，表明TAT-PEP可作为PirB的竞争性拮抗剂用于脑缺血损伤的研究与治疗。