鸡眼内淋巴组织的发育规律研究

鸡眼内淋巴组织包括哈德氏腺和结膜相关淋巴组织，是鸡特有的重要的黏膜免疫组织。本课题利用分子克隆和单抗技术研制鸡CD19特异性单克隆抗体。利用该单抗及其它单抗，通过流式细胞术、免疫组化等技术研究鸡眼内淋巴组织发育过程中免疫细胞的分布和变化规律。本课题对研究眼内淋巴组织的功能和点眼黏膜免疫的机理有重要基础理论价值，为将来研发相关黏膜免疫疫苗提供理论基础。本课题是禽类基础免疫学领域一项有重要意义的原创性研究，务望获得资助。

鸡眼内淋巴组织包括哈德氏腺（Harderian Gland,HG）和结膜相关淋巴组织(Conjunctiva-associate lymphoid tissue, CALT)，是鸡特有的粘膜免疫组织。本课题以不同发育阶段的鸡胚和雏鸡为研究对象，运用解剖学、组织学、免疫组织化学和流式细胞术等法，对其显微结构、超微结构、免疫细胞定位和分布、免疫细胞构成和数量等方面进行了研究。.1.HG发育组织学研究. HG的上皮下固有层中含有随日龄不断增多的淋巴细胞。至20日龄形成淋巴细胞群，其中含有大量的浆细胞。可以推测HG随日龄的增加，其在局部免疫中发挥的作用也增大。.2.HG淋巴细胞发育研究. B细胞中的IgM+、IgA+、IgG+细胞分别从12、13、17胚龄开始出现，均首先出现于固有层，而后不断增多，上皮中亦有阳性细胞，三类细胞均集中于管腔及腺上皮下。在数量变化上，经7日龄时一过性下降后，各类B细胞持续增加，数量始终以IgM+细胞最多， IgA+细胞次之，IgG+细胞最少，发育至1月龄左右达稳定成熟水平。. T细胞含量少且分布弥散，偶见T细胞团，周围包绕B细胞，其功能有待研究。3.CALT发育组织学研究. 淋巴细胞弥散于整个CALT区的固有层。从1日龄起在上皮下有淋巴滤泡分布，随着日龄增大，淋巴细胞分布越来越广，淋巴滤泡也越来越多，出现大量的次级淋巴小结，生发中心。扫描电镜观察的结果显示淋巴上皮内有M细胞分布。这些结果表明CALT具有粘膜免疫的细胞学基础。.4. CALT淋巴细胞发育研究. B细胞中IgM+、IgA+细胞均从12胚龄开始出现，IgG+细胞从1日龄开始出现，均从固有层开始出现，随后向粘膜上皮方向迁移，上皮内也有分布，至1月龄左右弥散分布于整个CALT。在固有层形成的淋巴小结中主要含有IgM和IgG阳性B细胞，IgA的含量较少一些。B细胞总量不大，细胞数在5日龄减少，此后略增多。. CALT中T细胞多，在14胚龄开始出现并增多。初期分布在固有层中，随后渐向上皮方向迁移，并在上皮下形成淋巴细胞群， CD4+T细胞含量持续比CD8+T细胞高。随着日龄增加，CD4+T细胞在固有层分布更密集，而CD8+T细胞分布较弥散，其多分布在上皮下。上皮下有少量巨噬细胞。这些细胞一起分布在粘膜固有层中，使CALT具有成熟的细胞和体液免疫功能。