急性白血病缓解状态下不同负荷微小残留病对正常造血干/祖细胞功能的影响及机制

临床观察发现处于完全缓解期的急性白血病患者在巩固强化治疗过程中，如出现较长时间骨髓增生低下、血象不能恢复正常，即使此时骨髓象原始幼稚细胞仍在5％以下，却往往是白血病即将复发的先兆。这一现象提示完全缓解患者体内微小残留白血病（MRL）负荷的增长可通过某种未知途径对正常造血干/祖细胞的自我更新及增殖分化起抑制作用，但确切机制尚未阐明。我们在前期工作中已构建成功稳定表达增强型绿荧光蛋白标志基因的小鼠急性淋巴细胞白血病MRL动物模型，本项目以该模型为平台，采用一系列干细胞生物学研究技术从自我更新和增殖分化等方面研究不同负荷MRL对正常造血干/祖细胞生物学功能的影响；采用基因芯片方法重点分析与自我更新和归巢相关基因的表达差异，应用抗体中和试验和基因转染技术验证候选基因，期望能阐明白血病完全缓解状态下MRL影响正常造血干细胞自我更新及增殖分化的细胞和分子生物学机制，为临床彻底清除MRL提供新思路。

目前已有的治疗手段使得急性白血病的完全缓解率达到55%（预后不良组）-90%（预后良好组），但完全缓解后白血病复发率仍很高，即使是骨髓移植的病人，复发率仍有19%-29%（异基因骨髓移植）和35%-48%（自体骨髓移植）。微小残留白血病(Minimal Residual Leukemia, MRL) 是指急性白血病完全缓解后体内残留微量白血病细胞的状态，在白血病治疗缓解期内的MRL是急性白血病复发的根源。.很多学者对MRL难于被消灭可能原因进行了大量的研究：放化疗对白血病细胞是对数级杀灭，但不可能将白血病细胞杀灭到零，最终杀灭MRL细胞必须依赖机体自身的免疫监视功能。骨髓移植与化疗相比， 白血病复发率低的主要原因不完全在于骨髓移植前的放疗或化疗杀灭白血病细胞，还有赖于免疫介导的移植物抗白血病作用。但MRL病人的正常免疫监视功能受损，对杀灭残留白血病细胞极为不利。了解微小残留白血病细胞的生物学机制，尤其是微小残留白血病细胞对正常造血干细胞的增殖、分化产生的影响、可望为提高和恢复MRL病人的免疫监视功能提供理论基础。.申请者发现临床处于完全缓解期的急性白血病患者在巩固治疗过程中，如出现较长时间骨髓增生低下、血象不能恢复正常，即使此时骨髓象原始幼稚细胞仍在5％以下，却往往是白血病即将复发的先兆。这一现象提示完全缓解患者体内MRL负荷的增长可通过某种未知途径对正常造血干/祖细胞的自我更新及增殖分化起抑制作用。有些学者推测MRL可直接抑制正常HSC/HPC的增殖分化；而申请者在对小鼠急性淋巴细胞白血病发病机制的研究中发现白血病发生的早期阶段，正常HSC/HPC的数量虽无明显改变，但其造血重建功能已显著减弱；随着疾病的进展，小鼠体内的白血病细胞数量逐渐增多，正常HSC/HPC的数量相应随之减少，同时HSC/HPC表面的归巢相关分子（CD44、CD26）表达也显著下降。提示白血病的发生和发展可通过抑制HSC的归巢功能导致其自我更新和增殖分化能力的下降。为此我们建立了不同负荷MRL的急性淋巴细胞白血病小鼠模型，比较研究了存在不同负荷的MRL细胞小鼠体内的HSC/HPC细胞功能， 采用基因芯片方法分析MRL细胞对正常造血干/祖细胞生物学功能的影响，重点分析与分化、凋亡和自我更新以及归巢相关基因的表达差异，从而发现更适合临床的预测白血病复发的方法，为临床彻底清除MRL提供新思路。