绵羊早期胚胎发育阻滞与基因表达差异及作用的研究

目前，体外培养条件下，相当部分胚胎的发育阻滞现象已严重制约了胚胎生物工程相关技术的发展。本研究拟采用抑制性差异消减杂交法、RNA干涉和基因表达相结合的方法，以体内来源的胚胎为检测对象，体外正常培养条件下，发生发育阻滞的胚胎为mRNA消减杂交驱动模板，筛选构建表达差异cDNA文库，经测序与比较分析，筛选并得到差异表达基因序列，从正反两方面探索差异表达基因对早期胚胎发育的影响，分别采用RNAi干涉降低早期胚胎细胞中内源表达量和基因构建表达的方法，研究差异基因表达与胚胎发生发育阻滞间的机制，从而筛选出对发育阻滞有重要影响的基因。研究结果为进一步开展蛋白差异表达研究奠定了基础，对揭示反刍动物早期胚胎发育阻滞与基因表达调节方面的规律、早期胚胎的发育调控、丰富早期胚胎发育生物学的理论等方面均有着重要意义，同时也必将进一步促进哺乳动物胚胎工程相关技术的发展和应用。