本研究从绵羊cDNA文库中利用同源筛选和PCR技术克隆得到绵羊间隙连接蛋白(connexin,CX)CX30.1、CX40、CX45基因cDNA序列。从绵羊卵巢提取RNA,通过RT-PCR得到绵羊CX26、CX32、CX43基因cDNA序列。通过RT-PCR和免疫荧光组织化学方法,利用激光共聚焦成像系统,重点观察以上六种间隙连接蛋白基因在羊早期胚胎发育和着床过程中的表达量、表达时间和部位。利用激光共聚焦系统结合荧光光漂白恢复技术(FRAP)观察原核期至孵化囊胚不同发育阶段的胚胎细胞间隙连接通讯(GJIC)的有无及建立时间,分析间隙连接蛋白的表达与GJIC形成的关系,对早期胚胎发育以及对胚胎质量的影响,从分子的角度探讨体外胚胎质量低于体内胚胎的原因,为胚胎体外发育系统的改进、胚胎质量的提高及移植妊娠率的提高提供实验依据。
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数据更新时间:2023-05-31
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