延髓头端腹外侧区的内源性大麻素1型受体在高血压发病机制中的研究

It is reported that cannabinoid type 1 receptor (CB1R) activation in the rostral ventrolateral medulla oblongata (RVLM) induced sympathoexcitation and hypertension. Our pilot studies revealed that in spontaneous hypertension rats, expression of CB1R was increased and inhibition of CB1R reduced renal sympathetic efferent discharge and blood pressure. Whether over expression and activity of CB1R in RVLM is related to induce hypertension, and the underlying mechanisms are not clear. In this study, we will use the spontaneous hypertension rats to study. Firstly in overall level, activation CB1R in RVLM enhances sympathetic nerve activity and blood pressure. Secondly study the CB1R expression in different neurons in RVLM.Thirdly study the neurons discharge activity using electrophysiology technology. Finally explore the underlying signal transduction pathway of CB1R. These findings will have important theoretical significance and potential clinical theraputic value to hypertension .

近些年文献报道，激活大鼠延髓头端腹外侧区（RVLM）的内源性大麻素1型受体（CB1R）可以导致交感神经兴奋性增加、血压升高。我们前期研究发现，自发性高血压大鼠RVLM的CB1R表达明显高于正常对照大鼠，应用阻断剂阻断自发性高血压大鼠RVLM的CB1R可以使肾神经放电减弱、血压下降。高血压交感活动过强，是否与RVLM中CB1受体的过度表达和过度激活相关，其机制如何，到目前为止尚不清楚。本项目拟采用自发性高血压大鼠模型，首先从整体水平，观察RVLM中CB1R的过度激活，导致交感神经过度紧张、血压升高；其次观察RVLM中不同神经元的CB1R表达情况；再次用电生理的方法观察RVLM中神经元的放电活动；最后探讨RVLM中CB1R激活后胞内信号转导途径。为高血压发病机制和临床治疗提供新思路。

本项目重点研究了高血压大鼠延髓头端腹外侧区（RVLM）的内源性大麻素1型受体（CB1R）的过度表达和过度激活，导致了交感神经兴奋性增加、血压升高。应用药理学、生物化学和分子生物学、免疫组化、逆行荧光标记、膜片钳技术等技术，从整体大鼠水平、脑片水平、细胞水平、分子水平研究了延髓头端腹外侧区的内源性大麻素1型受体在高血压发病机制中的作用。研究结果显示（1）整体动物无论清醒还是麻醉状态，与对照Wistar大鼠比较，RVLM区微量注射CB1受体激动剂，可导致SHR大鼠肾神经放电的明显增加和血压的明显升高，CB1受体阻断剂AM251或CB1受体敲低后肾神经放电增加和血压升高的表现消失；（2）与对照Wistar大鼠比较，SHR大鼠RVLM区CB1受体蛋白的表达明显增加，进一步的免疫荧光双标显示，RVLM前交感神经元的CB1受体表达升高，谷氨酸能神经元和儿茶酚胺能神经元上CB1受体的表达都有所升高；（3）脑片膜片钳研究显示，SHR大鼠RLVM区前交感神经元的CB1受体过度表达和激活可以增加此神经元的放电频率和幅度，即增强此神经元的兴奋性，而这种兴奋性的增强与突触前神经元的活动无关。（4）通过对胞内信号转导的研究，确定激活神经元上的CB1受体，通过激活CAMP和PKA途径，进而使LKB1分子磷酸化，从而磷酸化胞内AMPK，进而增加前交感神经元的兴奋性。