激动心肌细胞内源性大麻素1型受体抑制L型钙通道的信号转导机制研究

2005年首次提出内源性大麻素可以对抗心肌缺血再灌注损伤和抗心律失常，我室进一步探讨了其机制，研究表明，内源性大麻素物质anandamide作用于内源性大麻素1型受体（CB1受体），加速心肌细胞L型钙通道失活，减慢失活后复活，从而减少钙内流，缩短动作电位时程（发表于BJP）。那么心肌细胞的CB1受体和L型钙通道之间是通过何种信号调节，其中的信号转导机制到目前为止国内外均未见报道。本项目在已有工作基础上，着重探讨激动心肌细胞膜CB1受体抑制L型钙通道的信号转导机制。应用药理学、膜片钳技术、生物化学技术和分子生物学技术，确定CB1受体为G蛋白偶联受体；在此基础上检测三条可能的信号转导途径；最后明确CB1受体与L型钙通道亚单位的关系。通过以上研究，最终从细胞和分子水平揭示心肌细胞CB1受体和L型钙通道之间可能的信号转导机制，进一步明确内源性大麻素对抗心肌缺血再灌注损伤以及抗心律失常的分子机制。

本项目着重探讨激动心肌细胞膜CB1受体抑制L型钙通道的信号转导机制。应用药理学、膜片钳技术、生物化学技术和分子生物学技术，从细胞和分子水平揭示心肌细胞CB1受体和L型钙通道之间可能的信号转导机制。首次发现（1）激动CB1受体后，通过激活Gia蛋白，抑制AC，从而降低cAMP含量，降低PKA的活性，从而抑制L型钙电流。（2）激活心肌细胞CB1受体后通过非Gia非Gbr依赖途径抑制细胞PKC的活性，从而抑制L型钙电流，此过程没有PLCβ-DAG途径参与。（3）激活CB1受体可以抑制L型钙通道，对Cav1.2通道电流和Cav1.3通道电流的抑制程度无明显差异。（4）Gbr-PI3K-AKT途径以及raf-MEK-ERK的激活没有参与CB1抑制L钙通道的信号转导。