转录因子的核质转运机制失调对骨髓瘤细胞异常增殖的影响

转录因子借助于核质转运发生入核或出核是信号通路激活或抑制的基础。我们前期工作发现NF-kB、Wnt/β-catenin和UPR信号通路的异常活化与多发性骨髓瘤（MM）密切相关，而对其核质转运机制认识尚不全面。本课题拟采用生物信息学、核酸转染、激光共聚焦显微镜、RNA干扰、荧光素酶报告试验、Western Blot、GST pull down和ChIP等技术手段，探讨MM中入核转录因子p65、β-catenin、XBP-1是否通过与入核受体Importin α、CAS作用，出核转录因子IkBα、APC、ERAD是否通过与出核受体CRM1作用的核质转运机制影响瘤细胞生物学行为；鉴定转录因子的核定位和核输出信号的序列特征；并阐明核质转运抑制剂或联合信号通路抑制剂后的核质转运调控功能。拟从一个新的角度探寻MM的分子机制，为确定新的药物作用靶点奠定理论基础、为设计新型的骨髓瘤治疗策略提供崭的思路。

多发性骨髓瘤（Multiple Myeloma）是一类恶性浆细胞单克隆性疾病，目前并不能治愈。NF-kB信号通路的异常激活与该病密切相关，p50/p65形成的二聚体为NF-kB通路重要的转录因子，入核后发挥重要的生物学功能。p50/p65入核过程需经典入核受体的Importinα/β1核转运途径完成核转位。目前，对入核受体Importinβ1在多发性骨髓瘤细胞中生物学功能的研究不十分清楚。我们将分别上调和下调Importinβ1分子，观察对NF-kB信号入核分子p65的调控机制，及MM细胞生物学功能的影响。通过免疫荧光和Western blot发现，上调Importinβ1可增加p65的入核；通过siRNA干扰和Importazole（IPZ）抑制Importinβ1可干扰p65核质转运，并下调NF-kB信号通路下游基因BCL-2、c-IAP1和XIAP转录，且抑制MM细胞增殖、诱导凋亡增加、影响细胞周期。结论：Importinβ1可调控P65入核，并调节多发性骨髓瘤细胞增殖、促进凋亡，可成为多发性骨髓瘤治疗新靶点。