DNA甲基化修饰在子宫平滑肌肉瘤发病机制中的作用研究

Uterine leiomyosarcoma (ULMS) is a gynecological malignancy with poor prognosis, but the mechanism of ULMS tumorigenesis is largely unknown. DNA methylation plays a great role in malignant tumor pathogenesis and progression. In this study, whole genomic DNA methylation microarray is conducted together with mRNA expression profiling to explore the possible participation of DNA methylation in ULMS. By combination of the two microarray data, we intend to screen several potential uterine leiomyosarcoma specific methylation genes (LMS-SMGs). Then tissue samples, in vitro and in vivo assays will be used to confirm these genes and their biological functions. Our preliminary data suggested that atypical leiomyoma (ALM) would be precancerous lesion of ULMS as they shared significantly similar molecular pattern. This study will provide further evidence to support the hypothesis that ALM is precancerous lesion of ULMS by comparing the expression of LMS-SMGs in ALM and ULMS. Overall, this project will provide new perspectives for the origin of ULMS and regulation of ULMS by DNA methylation and furthermore promote the progress of early diagnosis, new therapeutics and prognosis for ULMS.

子宫平滑肌肉瘤（ULMS）恶性程度高，预后差，其发病机制尚不清楚。DNA甲基化是恶性肿瘤的重要调控机制，本研究中课题组首先利用全基因组DNA甲基化芯片和mRNA表达谱芯片技术，从宏观上阐述DNA甲基化在ULMS进展中的作用，同时筛选出数个子宫平滑肌肉瘤特异性甲基化基因（LMS-SMGs），在组织标本、体内及体外实验中进一步筛选明确LMS-SMGs的生物学功能；课题组在前期工作中已经从多角度证实了不典型性子宫平滑肌瘤（ALM）和ULMS有相似的分子生物学改变，进而提出了“ALM可能是ULMS癌前病变”这一假说，本课题通过在比较ALM和ULMS之间LMS-SMGs的DNA甲基化和蛋白表达状态，从表观遗传学角度为“ALM可能是ULMS癌前病变”这一假说提供证据；本研究将为明确ULMS的甲基化调控和分子起源提供证据，对ULMS的早期诊断、新药靶点研发及改善预后等具有重要的临床意义。

子宫平滑肌肉瘤（ULMS）恶性程度高，预后差，其发病机制尚不清楚，其早期诊断、发现新药靶点及改善预后等具有重要的临床意义。DNA甲基化是恶性肿瘤的重要调控机制，本研究中课题组首先利用全基因组DNA甲基化芯片和mRNA表达谱芯片技术，从宏观上阐述DNA甲基化在ULMS进展中的作用，同时筛选出数个子宫平滑肌肉瘤特异性基因（UBE2C、MELK、TOP2A、PRC1、AURKA和CDC20等），其中UBE2C、MELK升高最为明显（>10倍），GO通路富集分析显示88个差异显著的基因富集于有丝分裂各个相关通路（mitotic cell cycle）（P=2.39E-64）。体内外实验证实MELK可以显著提高SK-LMS-114/115细胞的侵袭迁移、增殖及克隆形成能力，同时介导子宫平滑肌肉瘤细胞的多西他赛及阿霉素耐药，通过co-IP的方法验证MELK可直接调控RB和MAD2介导基因组不稳定性及细胞周期调节紊乱。提出不典型性子宫平滑肌瘤分子分型理论，Ⅱ型ALM中，P16，P53及HMGA2的免疫组化染色明显高于Ⅰ型（P＜0.01），其中MED12突变和HMGA2阳性仅出现于Ⅱ型ALM中（P＜0.01），I型ALM主要存在FH基因突变（85% vs 19%）。I型ALM可能与遗传性平滑肌瘤病和肾细胞癌( HLRCC)综合征，临床上应严密随访，II型ALM可能是LMS的癌前病变。进一步利用全基因组测序解释LMS的染色体不稳定性（CIN）特征。本研究明确明确ULMS的CIN分子机制，为ULMS分子诊断及靶向治疗提供依据和新治疗靶标。