刺糖多孢菌聚酮类活性物基因簇模块重组及杀虫新药物

刺糖多孢菌产生的聚酮类化合物多杀菌素成为国际上最有发展前景的广谱、高效和安全的新一代杀虫药物。刺糖多孢菌中负责多杀菌素生物合成的基因簇分子量大于80kb，共涉及23个基因，其中5个聚酮合酶基因（PKS）模块负责合成多杀菌素分子的主要结构大环内酯成份。本项目利用新的基因操作技术Red/ET重组工程技术，以对底物要求较为宽松的阿维菌素(avermectin)AT-L结构域替换多杀菌素AT结构域对其PKS基因簇进行模块重组，同时利用Red/ET重组工程和Φ6D4噬菌体介导技术对spnA、spnD等基因和鼠李糖基因进行靶标基因中断，以使多杀菌素分子结构改变，产生多种聚酮类衍生物，经高效液相色谱（HPLC）分离纯化，并采用靶标害虫高通量筛选，经液相色谱和质谱联用（LC-MS）及核磁共振（NRM）分析进行分子结构鉴定，获得高效广谱杀虫的新型聚酮类化合物多杀菌素分子，阐明其分子结构的改变与高活性的关系。