脑毛细血管周细胞在蛛网膜下腔出血后脑微血管痉挛的作用及机理研究

蛛网膜下腔出血（SAH）后存在脑血流量下降、脑缺血、氧利用下降甚至局部脑梗死的表现，但围绕颅内大血管痉挛的研究不能完全解释上述现象的发生。最近我们体外模拟SAH环境，发现溶血产物可直接引起视网膜毛细血管收缩，表明在SAH后可能存在毛细血管的功能障碍。而周细胞作为微血管的主要收缩细胞，其具有毛细血管分布的特性，又可向多个方向分化；这些特征决定了其在SAH病理生理环境下微循环的调控中具有重要的作用。据此，我们推测，在SAH后血性脑脊液的作用下，可能存在毛细血管外膜周细胞的功能变化，进而介导了所在微血管的缩窄，最终造成微循环障碍及脑的缺血性损害。本研究拟分别建立SAH的大鼠模型、微血管组织片模型及周细胞模型，借助免疫组化、免疫印迹、定量PCR、膜片钳、激光共聚焦等技术观察SAH后周细胞生物学特性及表型改变，分析其对SAH后脑循环的可能影响，探讨周细胞参与SAH后缺血性损伤的可能机制。

蛛网膜下腔出血（SAH）后存在脑血流量下降、脑缺血、氧利用下降甚至局部脑梗死的表现，但围绕颅内大血管痉挛的研究不能完全解释上述现象的发生。我们前期研究发现，体外模拟SAH环境，发现溶血产物可直接引起视网膜毛细血管收缩，表明在SAH后可能存在毛细血管的功能障碍。而周细胞作为微血管的主要收缩细胞，其具有毛细血管分布的特性，又可向多个方向分化；这些特征决定了其在SAH病理生理环境下微循环的调控中具有重要的作用。据此推测，在SAH后血性脑脊液的作用下，可能存在毛细血管外膜周细胞的功能变化，进而介导了所在微血管的缩窄，最终造成微循环障碍及脑的缺血性损害。本研究拟分别建立SAH的大鼠模型、微血管组织片模型及周细胞模型，借助免疫组化、免疫印迹、定量PCR、膜片钳、激光共聚焦等技术观察SAH后周细胞生物学特性及表型改变，分析其对SAH后脑循环的可能影响，探讨周细胞参与SAH后缺血性损伤的可能机制。研究结果显示，SAH后周细胞标志物pdgfrb和肌动蛋白α-SMA表达上调，利用钙离子拮抗剂尼莫地平不能逆转此过程。体外用血红蛋白处理培养的周细胞后可上调其胞内游离钙离子水平，NO缓释剂DETA/NO对SAH后周细胞功能变化有显著影响，提示NO/cGMP途径参与了SAH后周细胞介导的微血管痉挛。