VHL和ZBRK1相互作用在肾癌发生发展的分子机制

Inactivation or mutation of the VHL gene causes various tumors, including clear cell renal cell carcinoma (ccRCC). In our previous study, we identified ZBRK1 as an interaction protein of VHL by yeast two-hybrid screening. Our previous research indicated that ZBRK1 was significantly associated with tumor progression and prognosis. we provided evidences showing that ZBRK1 acts as a tumor suppressor in renal carcinoma by a variety of in vitro and in vivo assays. Furthermore, We found a single ZBRK1-binding site located in the VHL promoter region. Our data also showed that over-expression of ZBRK1 increased the transcription level of VHL and inhibited the VEGF transcription. So we build hypothesis that low ZBRK1 transcripts in renal cancer led to abnormality of VHL/HIF pathway, which contribute to the cell growth, invasion, and metastasis. In this project, we plan to systematically study the molecular mechanism of the interaction between VHL and ZBRK1 in renal cancer development and progression,enrich the molecular biology theory and finally contribute to the therapeutic use of VHL and ZBRK1 in RCC.

VHL 基因的缺失或突变可导致许多肿瘤，包括透明肾细胞癌。我们利用酵母双杂交技术，以 VHL 基因为诱饵发现ZBRK1 是一个新的 VHL相互作用蛋白。我们发现ZBRK1在肾癌中表达降低并且与肾癌进展及患者预后密切相关。我们通过一系列体内和体外实验证实ZBRK1在肾癌发生发展中起着抑癌基因的作用。此外，我们还发现ZBRK1通过结合到 VHL基因启动子上上调 VHL 的表达，进而抑制 VEGF 的表达。因此，我们提出假说在肾癌发展过程中，ZBRK1的低表达导致VHL/HIF通路异常，从而引起或加剧肾细胞癌的增殖、侵袭和转移。本项目拟明确VHL/ZBRK1相互作用在肾癌发生发展中的分子机制，丰富肾癌相关分子生物学理论，为肾癌治疗提供新的策略和靶点。

VHL基因在许多肿瘤中失活或突变，其中包括肾透明细胞癌（ccRCC）。我们利用酵母双杂交技术，以VHL基因为诱饵发现ZBRK1 是一个新的 VHL相互作用蛋白。此外，我们还发现VHL基因的启动子上包含ZBRK1基因的结合位点。过表达ZBRK1能够增加VHL基因的转录活性，而通过shRNA下调ZBRK1的表达明显降低VHL基因的表达。我们还证实ZBRK1能够抑制VEGF的表达，且这个途径依赖于VHL/HIF信号通路。此外，我们还证实VHL是ZBRK1和p300的一个接头分子，能够介导ZBRK1的转录激活活性，从而增加VHL基因的表达。此外，我们还通过一系列的体内外实验证实ZBRK1在ccRCC的发生发展过程中是一个肿瘤抑制因子，并且ZBRK1的低表达是肾透明细胞癌患者预后不良的独立分子指标。因此，本研究证实了ZBRK1可能通过调节VHL基因的表达，进而抑制ccRCC的发生发展。本项目明确了VHL/ZBRK1相 互作用在肾癌发生发展中的分子机制，丰富肾癌相关分子生物学理论，为肾癌治疗提供新的策略和靶点。