槲皮素对瘢痕疙瘩成纤维细胞放疗增敏作用与乏氧诱导因子表达的影响及机制的研究

瘢痕疙瘩是良性肿瘤，但具有向周围正常组织浸润生长的特性，并伴有难以忍受的痒痛,因此,严重的影响了患者的生活质量,长期存在的瘢痕疙瘩内可出现组织的坏死，导致瘢痕癌，目前，缺乏有效的治疗手段。因此，对瘢痕疙瘩的研究有很高的临床意义。本课题根据瘢痕疙瘩的生物学特性与恶性肿瘤类似的特点，以及瘢痕疙瘩组织中乏氧诱导因子高表达的事实,借鉴肿瘤学对乏氧诱导因子作用的研究成果，在前期工作成果的基础上，进一步对槲皮素作用后的乏氧瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物学改变进行分子水平的检测，明确槲皮素和放疗干预后对乏氧诱导因子HIF-1α蛋白表达的影响，并通过建立瘢痕瘤的裸鼠动物模型，实体验证槲皮素成为瘢痕疙瘩放疗增敏剂的可能性。该课题是国内外首次对槲皮素作用乏氧的瘢痕疙瘩成纤维细胞后乏氧诱导因子蛋白表达变化的研究，也是黄酮类药物对瘢痕疙瘩放疗增敏作用在动物研究中的首次尝试，为瘢痕疙瘩放疗抵抗的研究提供了新的平台。

瘢痕疙瘩被认为是一种皮肤良性肿瘤，具有向周围正常组织浸润生长的特性，并伴有难以忍受的痒痛，严重影响患者的生活质量。长期存在的瘢痕疙瘩内可出现组织的坏死，反复感染，最终导致瘢痕癌。至今为止，尚缺乏行之有效的治疗手段。因此，对瘢痕疙瘩治疗的研究有很高的临床意义。本课题根据瘢痕疙瘩的生物学特性与恶性肿瘤类似的特点，以及瘢痕疙瘩组织中乏氧诱导因子高表达的事实，借鉴肿瘤学对乏氧诱导因子作用的研究成果，在我们前期工作成果的基础上，进一步对放疗和/或槲皮素作用后的瘢痕疙瘩成纤维细胞的生物学改变进行分子水平的检测，明确槲皮素和/或放疗干预后对瘢痕疙瘩成纤维细胞乏氧诱导因子HIF-1α表达的影响。.本课题通过构建瘢痕疙瘩来源成纤维细胞的乏氧细胞模型，明确体外培养瘢痕疙瘩来源成纤维细胞在乏氧环境中增殖生长速率明显要高于正常培养环境对照组。通过不同放疗剂量干预下，明确瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞对放射治疗具有抵抗作用，且这种抵抗作用主要体现于细胞凋亡水平的下降。瘢痕疙瘩来源的成纤维细胞较正常皮肤组织来源成纤维细胞高表达HIF-1α，且放疗干预可增加HIF-1α的表达，这提示了其放疗抵抗作用可能与HIF-1α有关；另外，新鲜瘢痕疙瘩组织切块中HIF-1α呈高表达状态。通过不同剂量槲皮素干预后，明确了槲皮素能够促进瘢痕疙瘩来源成纤维细胞的凋亡，并呈剂量依赖关系。在乏氧条件下槲皮素干预可明显降低瘢痕疙瘩来源成纤维细胞HIF-1α的表达。总之，槲皮素干预对瘢痕疙瘩来源成纤维细胞放疗抵抗具有增敏作用。. 虽然通过上述实验结论基本能够证明槲皮素通过降低HIF-1α表达而具有瘢痕疙瘩来源成纤维细胞放疗增敏作用，但缺乏将HIF-1α表达沉默实验步骤，如能够进一步完善该步骤，则更能从反向验证实验结果，使结果更可靠。