牛病毒性腹泻病毒不同生物型的分子差异及其机制研究

应用RT-PCR方法对国内不同地区分离的3株CP和1株NCP毒株的P125蛋白编码区外源序列插入区进行扩增和序列比较分析，同时以Northern杂交比较不同基因的全基因组，结果表明国内的NCP毒株（184，D，H株）在这一区域既无外源细胞序列的插入、核苷酸缺失，也没有基因重组、重排现象，但这一区域存在某些核苷酸和氨基酸替换。对国内不同地区分离的BVDV毒株进行基因克隆、序列测定与分析比较，首次确定国内的BVDV存在着Ia和Ib两个基因亚型。应用RT-PCR方法，扩增NADL株外源插入序列，克隆于PcDNA-3载体HindⅢ和BamHI位点，并将质粒转染于MDBK细胞，筛选表达外源插入序列的MDBK细胞株，然后接种NCP BVDV yak株，经观察MDBK细胞未出现空泡病变。