肿瘤抑制因子hTid1调控JAK2-STAT1信号转导通路机制研究

hTid1是果蝇肿瘤抑制因子Tid56的人类同源蛋白,它也是DnaJ家族协同分子伴侣中的一员，主要定位于细胞的线粒体基质中。研究发现hTid1对于伽马干扰素激活的Janus蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)信号通路是一种新的负调控因子，但是其调控的分子机制至今还不确定。本课题将对hTid1如何调控此信号通路的分子机制进行系统研究，确定hTid1调控伽马干扰素诱导的Jak2-Stat1信号转导通路的关键结构位点；hTid1对Stat1的磷酸化修饰的影响，尤其是hTid1对Stat1丝氨酸727磷酸化的修饰作用；以及hTid1对Stat1在细胞胞浆和细胞核间的穿梭转运的调控机制。研究结果将为阐明hTid1调控伽马干扰素激活的这一重要信号通路的分子机制，进一步明确它在与肿瘤相关的信号通路中的潜在作用，为我们将来利用hTid1作为一个靶点来治疗肿瘤及开发相关药物奠定基础。

hTid1 是果蝇肿瘤抑制因子Tid56 的人类同源蛋白,它也是DnaJ 家族协同分子伴侣中的一员，主要定位于细胞的线粒体基质中。hTid1 对于伽马干扰素激活的Janus 蛋白酪氨酸激酶-信号转导子和转录激活子(JAK-STAT)信号通路是一种新的负调控因子，但是其调控的分子机制至今还不明确。本项目研究中，（1）我们应用所构建的不同结构的hTid1对伽马干扰素诱导的基因转录的作用，确定hTid1 蛋白中抑制伽马干扰素诱导的基因转录的结构域；确定hTid1蛋白调控伽马干扰素诱导的信号转导通路的具体途径及其起作用的场所；（2）明确了hTid1蛋白对于伽马干扰素诱导的Jak2/Stat1 信号转导通路中的关键蛋白Stat1的磷酸化修饰的调控作用；（3）明确细胞中hTid1蛋白表达水平是否会影响Stat1蛋白及mRNA水平；（4）因为在Jak2/Stat1信号转导通路中，Stat1 蛋白水平至关重要，它将决定Stat1酪氨酸及丝氨酸磷酸化的水平；我们研究发现Stat1的降解依赖于hTid1及Stat1 丝氨酸727的磷酸化；（5）明确了hTid1是否通过参与Stat1的降解，影响Stat1在细胞质和细胞核间的入核和出核转运来调控伽马干扰素诱导的信号转导通路。. 此外，我们还结合临床，收集了食管鳞癌患者的肿瘤及配对癌旁组织，并应用RNAi技术敲降食管鳞癌细胞中hTid1-S蛋白表达水平，系统研究了hTid1-S与食管鳞癌发生发展的关系以及分子机制。研究发现，（1）食管鳞癌患者肿瘤组织中hTid1-S的表达水平要显著高于癌旁组织；（2）我们发现食管癌病人肿瘤组织中hTid1-S蛋白水平与临床分期及病理分级具有显著的正相关性；（3）食管癌细胞中hTid1-S蛋白的下调显著抑制细胞的氧化磷酸化水平；（4）食管癌细胞中hTid1-S蛋白的下调显著促进细胞的糖酵解水平；（5）hTid1-S蛋白下调导致裸鼠成瘤能力下降. 研究结果初步阐明hTid1 调控伽马干扰素激活的这一重要信号通路的分子机制，进一步明确它在与肿瘤相关的信号通路中的潜在作用，为我们将来利用hTid1 作为一个靶点来治疗肿瘤及开发相关药物奠定基础。