滤泡调节性T细胞通过TIGIT/CD226信号竞争性抑制滤泡辅助T细胞功能在维持移植免疫耐受中的机制研究

The project first proposed that TIGIT+Tfr cells control Tfh-induced B cells activation and antibody-mediated immune response, play a major role in chronic allograft tolerance. Tfr cells interact with FDC and B cells via CD155-TIGIT-CD226 signaling pathway, complete with Tfh cells, inhibit Tfh-B cell interaction; Tfr cells promote the secretion of regulatory cytokine granzyme-B, TGF-β and IL-10, inhibit Tfh cell function and mediate long-term allograft tolerance. Through this project on Tfr-cell regulatory mechanism, we aim to demonstrate Tfr inhibit Tfh through CD155-TIGIT-CD226 signaling pathway, find specific transcription factor within Tfr cells involved in the regulation of Tfh cells and humoral immune response, to inhibit Tfh-B reaction, prevent donor-specific antibody production and promote the maintenance of transplant immune tolerance. We aim to verify that TIGIT/CD226 are important molecules participating in the regulation of Tfh/Tfr cell balance in GC, and evaluate serum TIGIT/CD226 and the ratio Tfh/Tfr cells as predictive biomarkers in allograft rejection and kidney transplant dysfunction.

课题首次提出TIGIT+Tfr控制Tfh诱导B细胞活化产生特异性抗体介导免疫反应，在参与移植后慢性排斥风险中扮演核心角色。Tfr细胞通过CD155-TIGIT-CD226信号通路，与Tfh竞争性结合FDC和B细胞，抑制Tfh-B细胞间相互作用；促进调节性细胞因子Granzyme-B、TGF-β、IL-10分泌，抑制Tfh细胞功能，介导移植物长期耐受。深入研究Tfr如何通过CD155-TIGIT-CD226信号通路抑制Tfh的功能，寻找Tfr参与调节Tfh体液免疫反应的特异性作用靶点，抑制Tfh-B反应，防止供者特异性抗体产生，促进移植免疫耐受的维持，验证TIGIT/CD226分子是调节GC中Tfh/Tfr细胞平衡的重要靶点，评估血清TIGIT、CD226分子、外周Tfh/Tfr细胞比值作为预测移植物排斥、移植肾失功的生物学标志物在维持移植受者免疫耐受中的作用是本课题的重要研究目标。

项目拟研究TIGIT、CD226免疫信号分子调控肾移植受者滤泡调节性T细胞（Tfr）参与抑制Tfh-B细胞反应在维持移植物耐受中的作用，探究CD155-TIGIT 信号活化Tfr细胞内潜在转录因子在介导免疫调节性细胞因子IL-10、Gramzyme-B、TGF-β表达中的作用。执行中补充研究关注天然免疫细胞在参与慢性肾移植排斥反应的炎性状态及效应作用机制，分析肾移植受者外周血多个炎性细胞因子与趋化因子表达水平与适应性免疫细胞和天然免疫细胞共同介导的免疫炎性反应的相关性，以期探索能作为早期预示排斥反应发生的敏感生物标志物；尝试培养干细胞诱导的肾脏类器官，以期用于后期的免疫抑制药物对肾脏的毒性研究与免疫炎性损伤的细胞实验。.研究提示淋巴结Tfr细胞发挥免疫抑制作用以TIGIT分子起主导调节作用，外周血Tfr细胞发挥免疫抑制作用以CD226分子起主要调节作用。Blimp-1分子确实参与介导了肾移植受者体内多个免疫细胞亚群的表达调控。PD-1+ICOS+Tfh, CD226+Tfh/TIGIT+ Tfh细胞比例与eGFR联合检测可用于评估CAMR疾病进展与移植肾功能状态的实验室诊断诊断指标。肾移植术后定期动态监测外周血Tfh细胞、B细胞亚群可提供肾移植术后免疫功能监测的重要信息，相关免疫检查点可能成为治疗CAMR的潜在靶点。.外周血PBMC单细胞RNA测序结果初步提示天然免疫细胞及其炎性效应因子在参与肾移植术后AMR的免疫炎性损伤发生过程中具有重要作用。证实肾移植受者发生AMR时体内有活跃的免疫炎性状态，也初步提示外周血炎性因子水平能作为反应肾移植术后AMR发生免疫炎性损伤的生物标志物。.初步培养出干细胞诱导的肾脏类器官组织。对肾脏类器官组织的活性与稳定性还将进一步积累经验与探索。