一个潜在的抑制性细胞因子CCDC134的功能和机制研究

在前期研究和寻找人类重要功能新基因的过程中，我们首次发现了一个新的、能明显抑制MAPK信号通路的分泌蛋白，CCDC134(coiled-coil domain containing 134)。特别是功能研究显示，CCDC134蛋白可结合细胞表面尚未鉴定的受体分子，抑制ERK-MAPK通路，从而抑制抗CD3和CD28抗体联合刺激或PHA刺激的T淋巴细胞活化，提示CCDC134可能作为一个新的、具有免疫抑制作用的分子，在免疫应答的过程中发挥重要的负向调节作用。本项目拟进一步确认CCDC134对T淋巴细胞的负向调节作用；在炎症发生过程中的意义及其可能的作用机制；明确其是否为一个新的抑制性细胞因子。

我们已经基本按计划完成了该课题，并在项目实施过程中获得了一些创新性发现。该项目在立项初期获得的结果提示重组人CCDC134蛋白能明显抑制抗CD3&CD28抗体联合刺激或者PHA单独刺激的人外周血混合淋巴细胞的活化，但在项目进展中，我们利用磁珠分选的方法分离获得CD4+ 和CD8+ T淋巴细胞，分别选用抗CD3和CD28抗体亚剂量联合刺激或者PHA单独刺激，发现人CCDC134蛋白能明显促进CD8+ T淋巴细胞的活化，而对CD4+ T淋巴细胞无明显作用。因此后期我们针对CD8+ T淋巴细胞探讨人CCDC134蛋白的功能。已获得的一系列研究结果：①建立了纯系CCDC134转基因小鼠，用于后续CCDC134体内动物实验和免疫机制的研究；②体外实验证实CCDC134直接作用于CD8+ T淋巴细胞，促进其活化、增殖及增强其特异性杀伤活性；荷瘤小鼠模型证实CCDC134可以通过免疫系统发挥抗肿瘤的效应，其机制是上调肿瘤浸润淋巴细胞中CD8+ T淋巴细胞的数目，并增强其活化和杀伤活性。③EAE小鼠血清中CCDC134表达高于正常小鼠，CCDC134能明显加重EAE的发病，并影响CNS浸润的免疫细胞分类。④CCDC134的受体可能为CD69分子。获得这些具有原始创新的研究成果引导我们继续探讨CCDC134的功能，期望之后能进一步获得课题资助，明确其在抗肿瘤和EAE发病过程中的作用机制；为肿瘤治疗提供新型生物技术候选药物，同时也可能成为自身免疫性疾病的诊断和治疗提供新的靶标。