人胶质瘤干细胞自分泌bFGF机制研究及对细胞自我更新的影响

胶质瘤干细胞是胶质瘤发生和复发的根源。自我更新是其维持干细胞特性关键，阻断自我更新将使其进入有限增殖的分化阶段，丧失成瘤能力。前期实验发现人胶质瘤干细胞通过自分泌bFGF维持其在无外源性细胞因子培养基中自我更新和增殖，且检测到胶质瘤干细胞内有可能调节bFGF表达的Egr-1基因转录和可诱导Egr-1基因表达的EGFR表达，结合文献关于EGFR/ERK/Egr-1信号通路和胶质瘤组织表达独立活化的EGFRvⅢ报道。我们推测：人胶质瘤干细胞可能藉由EGFRvⅢ→ERK→Egr-1活化路径实现对bFGF的自分泌调节，从而维持其独立的自我更新调节。本课题拟通过干预人胶质瘤干细胞内EGFRvⅢ/ERK/Egr-1信号途径中关键因子的作用，观察下游基因和bFGF表达变化及对胶质瘤干细胞自我更新的影响。初步探讨人胶质瘤干细胞自分泌bFGF的调节机制及该机制对人胶质瘤干细胞自我更新和成瘤能力的影响。

根据课题的研究计划，我们检测了154例胶质瘤患者肿瘤组织EGFRvⅢ的表达。结果显示在不同分级的胶质瘤细胞均有细胞表达EGFRvⅢ。且随着分级的增高，EGFRvⅢ的表达逐渐增强。对分离、培养的胶质瘤干细胞的免疫细胞化学检测显示，细胞均有EGFRvⅢ蛋白的明显表达。.在前期对胶质瘤干细胞Egr-1表达的RT-PCR检测发现细胞有mRNA的转录。进一步的免疫细胞化学检测及Western-blot检测分析显示未见胶质瘤干细胞Egr-1蛋白的表达。我们转而对EGFR信号通路下游的另一转录因子STAT3的表达进行了检测分析。RT-PCR和免疫细胞化学检测结果均显示胶质瘤干细胞内有着STAT3的表达、活化。.由此,我们构建了STAT3 siRNA表达载体。通过RNAi方法抑制胶质瘤干细胞STAT3的表达和活化后，我们观察到胶质瘤干细胞自我更新能力下降，CD133+细胞比例降低，bFGF表达减少，移植到裸鼠后成瘤能力下降。.研究部分结果在《Int J Oncol》、《中华神经外科疾病研究杂志》各发表论著一篇。