调控结直肠癌转移相关基因SATB2的重要miRNAs的鉴定及功能研究

本课题组前期实验结果表明，SATB2基因在结直肠癌中异常低表达，与结直肠癌转移及不良预后密切相关，是一个新的结直肠癌转移相关基因，但其低表达调控机制不明。最近，我们通过综合不同转移潜能结直肠癌细胞系的miRNA差异表达谱及生物信息学分析的结果，预测miRNA-31、miRNA-27b和miRNA-182可能调控SATB2的表达；瞬时转染三种miRNA模拟物后，SATB2蛋白表达均有不同程度的降低。在此基础上，本项目拟采用qRT-PCR、原位杂交、构建SATB2基因3'UTR荧光素酶报告基因载体、miRNA转染、表达阻断和细胞功能分析等手段，鉴定三种miRNA与SATB2表达间的关系，并从中鉴定出靶向调控SATB2的最有效miRNAs及调控作用机制，在转录后层面揭示SATB2在结直肠癌转移中作用的分子机制，为结直肠癌转移的预防和治疗提供新的策略。

本课题是在前期实验证明SATB2基因是一个新的结直肠癌转移相关基因的基础上，利用原位杂交、报告基因检测、miRNA转染、miRNA表达阻断、体内和体外实验等技术手段，对靶向调控SATB2基因的miRNAs及其参与结直肠癌侵袭、转移的分子机制进行了鉴定，成果如下：.1、miR-31和miR-182在结直肠癌组织和细胞系中表达上调，并与结直肠癌转移密切关；.2、结直肠癌组织中miR-31和miR-182的过表达与结直肠癌患者恶性表型及预后不良密切相关；.3、miR-31和miR-182在体内外均具有促进结直肠癌细胞增殖、运动和迁移能力；.4、miR-31和miR-182均能特意性抑制SATB2的表达；从而诱导结直肠癌细胞出现EMT转化，促进其转移。