GADA特异性AID防治NOD小鼠1型糖尿病的研究

根据Jerne的免疫网络学说，抗体与其抗独特型抗体(anti-idiotypic antibody,AID)相互作用，维持了免疫网络平衡，免疫网络平衡的打破将导致包括自身免疫在内的免疫疾病。我们在之前的研究中观察到，谷氨酸脱羧酶自身抗体（glutamate decarboxylase auto-antibody, GADA）的AID水平在健康人、1型糖尿病(type 1 diabetes, T1D)患者一级亲属以及T1D患者中逐渐下降，AID下降早于血清中检测出GADA，提示AID减少导致了自身抗体的暴露，促进了自身抗原递呈，启动了T1D自身免疫。早期进行AID替代治疗应当能够预防T1D发生。本研究将制备并鉴定GADA特异性单克隆AID；观察该抗体对NOD小鼠T1D的防治作用及其免疫调节作用；通过体外实验证实该抗体免疫调节作用的靶点是GAD65抗原递呈环节。

既往已有研究证实65kd的谷氨酸脱羧酶（65kd glutamate decarboxylase, GDA65)自身抗体(GADA)特异性抗独特型抗体(anti-idiotypic antibody, Aid)具有1型糖尿病(type 1 diabetes, T1D)潜在保护作用。本研究因此经杂交瘤技术筛选鉴定出一株GADA高特异性及高亲和力单克隆Aid用于T1D防治。该单抗能够以表位依赖及浓度依赖方式阻断人GADA b96.11与GAD65结合，并识别健康成人、2型糖尿病(type 2 diabetes, T2D)及T1D血清GADA。序列分析提示该单克隆Aid为重链为小鼠Ig2a，轻链为κ链。4周龄雌性非肥胖糖尿病(non-obese diabetic, NOD)小鼠每周接受腹腔注射50或者100ug单克隆Aid显著抑制胰岛炎症细胞浸润，延缓T1D发生；连续4次，每隔4天注射该单抗清除了NOD小鼠来源的GAD65特异性B淋巴细胞，提示GAD65特异性B淋巴细胞可能是该抗体的靶点。这些数据说明GADA特异性Aid可以作为T1D早期防治的新的手段，具有转化价值。