靶向牙周炎DNA疫苗的研制和免疫机制研究

利用分子克隆技术、基因转染技术、细胞免疫化学技术、荧光激活细胞分选仪技术、基因芯片技术，拟解决以下问题：1）获得牙龈卟啉菌菌毛主要亚单位FimA基因片断fimA和Kgp蛋白酶催化结构域基因片断kgpcd，克隆入含有人CTLA4基因片断的真核表达质粒pCTLA4-Ig中，构建CTLA4靶向牙周炎DNA疫苗，体外检测其表达产物与树突状细胞（DCs）的靶向定位能力；2）通过粘膜途径接种CTLA4靶向牙周炎DNA疫苗，检测其诱导特异性抗体的能力和诱导的免疫反应的类型，评价该疫苗在牙周炎动物模型中的免疫保护能力；3）体外将CTLA4靶向牙周炎DNA疫苗转染DCs，检测DCs的基因表达变化，探讨靶向牙周炎DNA疫苗引起免疫反应的可能机制。本研究意义在于研制高效的CTLA4靶向牙周炎DNA疫苗，在不同层面上干扰牙龈卟啉菌致病性，同时揭示DCs在CTLA4靶向牙周炎DNA疫苗引起机体免疫反应中的作用。