枸杞黄酮类化合物抑制FPR表达的抗肿瘤作用及机制研究

Many studies have showed that Wolfberry flavonoids could inhibite growth of a variety of cancer in vivo and in vitro, but its effect and mechanism on cancer is unknown. Formyl peptide receptor (FPR) mediated growth, metastasis and invasion of cancer cells, and involved tumorigenicity in nude mice. FPR can be used as a molecular target for anticancer drugs. In this study, MTT technique, flow cytometry, immunohistochemistry, light and electron microscopy were used to observe the effects of Ningxia Wolfberry flavonoids on the expression of FPR,and to detect the effects of Ningxia Wolfberry flavonoids on growth, invasion and metastasis in human cancer cells and its orthotopic transplantation tumors in nude mice and to explore the possible mechamism of Ningxia Wolfberry flavonoids anti-caner effect. The aim of the study was to provide experimental evidence for the possibility of clinical trails of Wolfberry flavonoids for cancer therapy.

既往研究已证实，枸杞黄酮类化合物对体内外多种肿瘤的生长具有显著的抑制作用，但其体内外抗肿瘤作用及作用机制尚待进一步研究。甲酰肽受体（FPR）介导人肿瘤细胞的生长和侵袭转移，参与裸鼠的致肿瘤性，可以作为抗肿瘤药物的分子靶点。本研究拟应用 MTT法、流式细胞术、免疫组化、光镜和透射电镜技术等观测宁夏枸杞黄酮类化合物对人恶性肿瘤细胞及其移植瘤组织中FPR表达的影响，同时检测宁夏枸杞黄酮类化合物对恶性肿瘤细胞及其移植瘤组织生长、侵袭转移的影响及其可能的作用机制，旨在为肿瘤的治疗以及宁夏枸杞黄酮类化合物的临床应用提供实验依据。

既往研究已证实，枸杞黄酮类化合物对体内外多种肿瘤的生长具有显著的抑制作用，但其体内外抗肿瘤作用及作用机制尚待进一步研究。本研究应用CCK8、ICC、real-time PCR及Western blot等实验方法检测了宁夏枸杞总黄酮（TFL）对人恶性胶质瘤细胞及乳腺癌细胞生长、侵袭转移的影响及其可能的作用机制。实验结果显示TFL能够抑制U87细胞增殖能力及PCNA表达；TFL能够抑制U87细胞的迁移侵袭，且细胞中MMP2、MMP9表达降低。Transwell、real-time PCR及Western blot实验结果表明抑制FPR1表达可以抑制U87细胞的迁移和侵袭及迁移侵袭相关基因MMP2和MMP9的表达。TFL呈剂量依赖性抑制乳腺癌细胞MCF-7细胞和MDA-MB-231细胞增殖、迁移与侵袭能力，但是不抑制正常乳腺上皮细胞MCF-10A的增殖。不同浓度TFL作用于MCF-7细胞与MDA-MB-231细胞后其细胞周期被阻滞，且能促进细胞凋亡，并改变细胞内Bcl-2/Bax蛋白的比例。不同浓度TFL作用于MCF-7细胞与MDA-MB-231细胞后，两株细胞内Akt的磷酸化水平降低，Akt和β-catenin蛋白减少，另外，MCF-7细胞中RhoA、Rac1/Cdc42、NF-κB、ERα蛋白含量降低，MDA-MB-231细胞中mTOR与Rac1/Cdc42仅在90μg·mL-1 TFL作用时减少。本研究结果表明宁夏枸杞总黄酮可以抑制恶性胶质瘤及乳腺癌细胞的增殖、迁移与侵袭，但其作用机制有所不同，为宁夏枸杞黄酮类化合物在不同肿瘤的治疗以及宁夏枸杞黄酮类化合物的临床应用提供了一定的实验依据。